产品货号:
KL220125
中文名称:
DNA洗脱液(基因组DNA专用)
英文名称:
DNA Elution Buffer for Genomic DNA
产品规格:
10mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是基因组DNA专用的DNA洗脱液,可用于去除污染物,回收高质量的基因组DNA。

- 去污染效果好。为基因组DNA分子提供长期稳定储存的环境。
- 可用于过柱法DNA的洗脱或DNA溶解。
- 扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
- 处理后的样品原液或稍微稀释后即可用于PCR。

| 组分 | 规格 |
| DNA洗脱液(基因组DNA专用) | 10mL |
| 说明书 | 1份 |
保存:室温,有效期1年。

以柱式动物DNA提取试剂盒为例:
动物DNA纯化溶液A容易产生沉淀,动物DNA纯化溶液B十分粘稠,用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀。
- 根据使用材料的不同进行下列操作:
- 对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的动物DNA纯化溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
- 对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1~5×106悬浮细胞中加入0.8mL预热的动物DNA纯化溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。如果是fibroblasts或carcinoma细胞,0.8mL动物DNA纯化溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
- 对新鲜或冷冻的组织:先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50~100mg组织加0.8mL预热的动物DNA纯化溶液A,用剪切式匀浆器匀浆30秒左右,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg。
- 对非冻型DNA保存液保存的组织:先用纸吸去保存液后再剪切成小块,其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
- 对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的动物DNA纯化溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
- 加入0.4mL预热的动物DNA纯化溶液B到裂解液中。由于动物DNA纯化溶液B十分粘稠,可将1mL枪头剪掉一截再用,也可以用称量方法加0.4g。加入动物DNA纯化溶液B后需要颠倒数次充分混匀。
- 65℃水浴5~10分钟。如果室温放置,DNA产量将降低10~20%。
- 加入0.2mL自备氯仿,振荡器上充分振荡混均30秒,此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
- 12000~15000×g室温离心2分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。
- 小心将上清液平均转移到两个新的离心管中,避免触及中间的白膜。
- 每个管中加入1.5倍体积的动物DNA纯化溶液C,充分颠倒混匀。
- 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000×g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000×g室温离心半分钟,弃穿透液)。
- 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000×g室温离心半分钟,弃穿透液。
- 加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000×g室温离心半分钟,弃穿透液。
- 12000~15000×g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
- 室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
- 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50~100μL DNA洗脱液(基因组DNA专用),室温放置离心吸附柱1~2分钟。
- 12000~15000×g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
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