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SDS分子具有亲水和疏水两性特征，在基因工程蛋白质药物的提取、纯化及抗原的制备的过程中有重要的应用价值，可是SDS的残留会对动物和人体产生毒副作用，因此随时监测SDS的残留有很重要的意义，本试剂盒采用特殊的含有染料的试剂，选择性的结合样品中的SDS形成复合物，这种复合物通过提供的有机试剂萃取到有机相中，再通过比色的方法测定其浓度；而未结合成复合物的染料在萃取后留在水相中，这样样品中SDS的含量就与被萃取到有机相中复合物在特定最大吸收波长的吸收值存在一定的线性关系，经测定在0.002%～0.014% SDS浓度范围内，标准曲线的线性关系良好。

• 溶液B极易挥发且有一定毒性，使用时请在化学通风橱中进行并做好防护措施。
  
• 待测样品检测后的A₄₉₉处OD值应在标准曲线范围之内，若超过此范围则需将样品酌情稀释。
  
• 因为染料和SDS-染料复合物有相同的最大吸收波长，当样品含有三氯乙酸时，会使水相中未被SDS结合的染料也被萃取到有机相中，增加了A₄₉₉值从而影响实验结果的准确性。
  
• 当SDS浓度低于0.002%时，常见的离子盐、氨基酸、糖类和蛋白质对SDS浓度的定量有很大的影响。
  
• 核酸物质如DNA可能干扰SDS浓度的定量，但含量在1ng以下的DNA并不影响定量结果。
  
• 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
  
• 使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
  
• 本试剂盒只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。

• 制作标准曲线
  
  • 称0.01g SDS粉末溶于10mL蒸馏水中，制成SDS标准溶液。
    
  • 取8支2mL离心管，按照下表平行操作。
    

    管号	0	1	2	3	4	5	6	7
    蒸馏水(μL)	1000	980	960	940	920	900	880	860
    SDS标准溶液(μL)	0	20	40	60	80	100	120	140
    SDS终浓度(%)	0	0.002	0.004	0.006	0.008	0.010	0.012	0.014

  • 另取8支2mL离心管，每管分别加入50μL相应浓度的SDS标准溶液。
    
  • 再向每管中加入50μL溶液A混匀。
    
  • 再向每管中加入1.5mL溶液B，剧烈振荡充分混匀3min，进行萃取。
    
  • 室温5000rpm(2000g)，离心5min，取上层液体。
    
  • 在分光光度计上测每管在A₄₉₉处的OD值。
    
  • 重复步骤3~7，依据相同SDS浓度，取两次同浓度下测量A₄₉₉处的OD值的平均值。
    
  • 以每管A₄₉₉平均值为纵坐标，对应的SDS浓度为横坐标，在坐标纸上或Microsoft Excel软件中绘制标准曲线。
• 未知样品中SDS浓度测定
  
  • 将样品作适当倍数的稀释。
    
  • 取3支2mL离心管，其中两管各加入50μL样品稀释液，另外一管加入50μL蒸馏水作为空白对照。
    
  • 再向每管中加入50μL溶液A，混匀。
    
  • 再向每管中加入1.5mL溶液B，剧烈振荡充分混匀3min，进行萃取。
    
  • 室温5000rpm(2000g)，离心5min，取上层液体置于分光光度计上测每管样品液在A₄₉₉处的OD值。
    
  • 计算两管样品稀释液在A₄₉₉处的OD值的平均值。
    
  • 根据两管样品稀释液在A₄₉₉处的平均值，在标准曲线上确定出待测样品稀释液的SDS浓度。
    
  • 根据下列公式计算待测样品的SDS浓度。
    
  • 样品中SDS浓度(%)=样品稀释液中SDS浓度×样品稀释倍数。