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植物细胞裂解液(用于Western/IP/ELISA)图片
产品货号:
YTB4012
中文名称:
植物细胞裂解液(用于Western/IP/ELISA)
英文名称:
Plant Cell lysis buffer for Western or IP
产品规格:
100ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品是一种在非变性条件下裂解植物细胞、组织或原生质体样品从而制备蛋白样品的裂解液,也可以用于动物的细胞或组织样品、真菌或细菌样品。本裂解液裂解的植物细胞、组织或原生质体样品,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。


本制品主要有效成分包括1% Triton X-100等去垢剂,以及sodium pyrophosphate、β-glycerophosphate、EDTA、Na3VO4、leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。裂解得到的蛋白样品,可以用我司的BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT036、YT037)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。




组分规格
植物细胞裂解液(用于Western/IP/ELISA)100mL
说明书1份

保存:-20℃,有效期1年。


  • 为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
  • 需自备PMSF,也可以向我公司订购PMSF (货号:YT615)。也可以选购总体效果更佳的通用型蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(货号:YTB4015),或者根据具体用途选择植物样品蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(货号:YTB4016)、通用型蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(质谱兼容,货号:YTB4017)、哺乳动物样品蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(货号:YTB4018)、真菌或酵母蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(货号:YTB4019)、细菌蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(货号:YTB4020)。如果无需检测磷酸化蛋白,也可以选不含磷酸酶抑制剂的蛋白酶抑制剂化合物。
  • 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。



  • 对于培养的植物细胞样品:
    • 融解植物Western及IP细胞裂解液,混匀。取适量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,或者根据实验需要加入适当的上述蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
    • 离心收集植物细胞,按照每50~100万细胞加入100~200μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触,在冰上裂解2~10min。
    • 充分裂解后,10000~14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
  • 对于植物原生质体样品:
    • 把组织剪切成细小的碎片,制备原生质体。
    • (可选)质粒转化原生质体,继续培养16~48小时,并可以根据需要给予适当的实验条件处理。
    • 100~500g低速离心收集原生质体。
    • 融解植物Western及IP细胞裂解液,混匀。取适量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
    • 按照每50~100万原生质体加入100~200μL裂解液的比例加入裂解液。轻弹管底以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的原生质体沉淀。如果原生质体量较多,必需分装成50~100万原生质体/管,然后再裂解。大团的50~100万原生质体较难裂解充分,而少量的50~100万原生质体由于裂解液容易和50~100万原生质体充分接触,相对比较容易裂解充分。
  • 对于植物组织样品:
    • 把植物组织剪切成细小的碎片。
    • 融解植物Western及IP细胞裂解液,混匀。取适量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
    • 按照每20mg植物组织加入100~200μL裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
    • 用玻璃匀浆器匀浆或使用组织研磨仪研磨,直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液氮研磨,研磨充分后加入裂解液进行裂解。
    • 充分裂解后,10000~14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
    • 如果植物组织样品本身非常细小和柔嫩,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器或研磨设备,缺点是不如匀浆或研磨那样裂解比较充分。



附录1.各种裂解液主要特点、差异和选择
货号产品名称有效裂解成分裂解强度对膜蛋白的提取对胞浆蛋白的提取对核蛋白的提取胞浆磷酸化蛋白提取细胞核转录因子提取含蛋白酶抑制剂含磷酸酯酶抑制剂不同物种样品兼容性主要用途
YT038WB及IP细胞裂解液1% Triton X-100温和一般很好较好很好很好WB,IP,co-IP
YT609RIPA裂解液(强)1% Triton X-100,
1% deoxycholate,
0.1% SDS
很好很好很好很好很好WB,IP
YT610RIPA裂解液(中)1% NP-40,
0.5% deoxycholate,
0.1% SDS
较好很好较好很好很好WB,IP
YT611RIPA裂解液(弱)1% NP-40,
0.25% deoxycholate
温和一般很好较好很好很好WB,IP,co-IP
YT613NP-40裂解液1% NP-40温和一般很好较好很好很好WB,IP,co-IP
YT039SDS裂解液1% SDS很好很好很好很好很好WB,ChIP
YT040Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)1% Triton X-100温和一般很好较好很好很好WB,IP,co-IP
YT614RIPA裂解液(强,无抑制剂)1% Triton X-100,
1% deoxycholate,
0.1% SDS
很好很好很好很好很好WB,IP
YTB4012植物Western及IP细胞裂解液1% Triton X-100温和一般很好较好很好很好植物WB,IP,co-IP
YTB4013植物RIPA裂解液(强)1% Triton X-100,
1% deoxycholate,
0.1% SDS
很好很好较好很好很好植物WB,IP

相关搜索:植物细胞裂解液(用于Western/IP/ELISA)植物蛋白制备液Plant Cell lysis buffer for Western or IP
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