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本制品是一种专门为类器官传代培养设计的用于消化和分散细胞的消化液。本制品为百奥莱博BalbOrganoid系列类器官培养液的配套试剂。百奥莱博同时提供更加温和的BalbOrganoid类器官传代温和消化液。

本制品温和、高效。相比常规的Trypsin-EDTA溶液，本制品作为一种复合酶溶液，其蛋白酶和胶原酶不含动物源性物质(AOF)。使用本制品可更好地保留类器官细胞表面受体的完整性，减少对细胞膜的损伤，保持传代后细胞的活力，温和而有效地消化和分散类器官细胞。百奥莱博同时提供可快速解开基质胶中蛋白质大分子间交联的BalbOrganoid类器官分离回收液

类器官(Organoid)通常指在体外显示出与体内器官或组织相似结构和功能的复杂三维(3D)结构，更严格的定义是指由干细胞或器官祖细胞发育而来的，作为体外平台模拟其对应器官的结构和功能等多个方面的3D细胞培养物。类器官在形成过程中，细胞自我组建并分化为功能型的微小细胞团，模拟真实器官发育，以与体内相似的方式由细胞分序与空间特异性的谱系分化调控，需激活由细胞内在成分和外在环境(细胞外基质、培养液等)介导的各种信号通路。

• 在使用本制品的过程中要特别注意避免被细菌污染。
  
• 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 使用前，若本制品储存于-20℃，请提前置于4℃解冻。
  
• 小心去除类器官完全培养液上清。
  
  • 避开类器官基质胶悬滴，吸取时注意不要将悬滴吸起。
• 使用200μL移液器轻缓吹吸，破坏类器官基质胶悬滴，并将类器官基质胶悬浮液转移至15mL无菌离心管中。
  
• 将各孔类器官基质胶悬滴均转移至15mL离心管后，向原培养板每孔中加入少量类器官基础培养液(例如24孔板每孔125μL，6孔板每孔250μL)，将残留的类器官基质胶转移至相应的15mL无菌离心管中。
  
• 使用5mL移液管将类器官/基质胶/类器官完全培养液混合物上下移液吹吸20～30次，以完全破坏基质胶结构。在这一步骤中，充分机械破坏基质胶结构，将类器官细胞从基质胶中释放出来非常关键。
  
• 300×g室温离心3分钟，去除上清，加入5mL PBS，吹吸混匀，300×g室温离心3分钟。
  
• 去除上清，将沉淀物重悬于1～2mL的本制品中，上下吹吸数次，置37℃孵育，直到类器官细胞团打散。类器官消化过程中，每2～3分钟使用移液管上下移液吹吸5～10次，并在显微镜下密切观察消化过程，严格把握类器官消化时间。
  
  • 通常来说，消化至单细胞或寡细胞团(由10～30个细胞组成)，则消化过程完成。
  • 某些类器官模型不应被完全消化成单个细胞，否则它们传代后的类器官结构形成能力将受损。如果有可用的模型特定信息，请参考该信息。
  • 对某些类器官模型而言，消化过长时间(>15分钟)可能会导致类器官细胞传代后生长不良甚至停止生长。
• 类器官消化到达终点后，加入5mL类器官基础培养液，吹吸混匀，300×g室温离心3分钟。
  
• 去除上清，将类器官沉淀物重悬于基质胶中，并进行传代培养。