产品货号:
LA10373
中文名称:
通用型病毒浓缩液
英文名称:
Universal Virus Concentration reagent,3X
产品规格:
50mL|500mL|5L
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品是一种简单、快速、高效的可用于多种常见重组病毒浓缩的产品。传统的病毒纯化方式是超速离心,这种纯化方式耗时,对设备要求高,且仅能处理有限的病毒液体。该病毒毒浓缩液可直接加入到含病毒的上清液中,使病毒沉淀,通过简单的离心与重悬步骤,即可有效提高病毒滴度。病毒回收率最高可达约90%,浓缩后病毒浓度可提高10~100倍。
本产品可用于实验室包装的慢病毒(Lentivirus)、逆转录病毒(Retrovirus)、腺相关病毒(AAV)、腺病毒(Adenovirus)和杆状病毒(Baculovirus)等病毒颗粒的浓缩。
组分 | 50mL | 500mL | 5L |
通用型病毒浓缩液(3X) | 50mL | 500mL | 5L |
说明书 | 1份 |
保存:4℃,有效期1年。
- 为避免病毒失活,浓缩前的病毒上清液或浓缩后的病毒都应尽量避免反复冻融。
- 细胞培养液中的血清对于病毒的沉淀和浓缩有一定的帮助。如果病毒包装用的细胞培养液是无血清或低血清培养液,或者需要从蛋白含量很低的溶液中浓缩病毒,建议在病毒浓缩时添加无菌的BSA至终浓度为3%,这样会显著提高浓缩效果。
- 涉及到病毒的相关操作务必要在生物安全实验室内进行,接触过病毒液体的耗材要做好相关的生物防护处理,防止污染。
- 本产品仅限于专业人员的科研用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 包装病毒完成后,收集含病毒的细胞上清液。4℃,3500×g离心10min以充分沉淀细胞碎片,小心吸取上清液用于后续的浓缩。也可取含病毒的上清液,使用0.45μm针头滤器过滤以去除细胞碎片。
注意:过滤时,须使用滤膜材质为聚醚砜(PES)的针头滤器对病毒上清液进行过滤,其它材质如硝酸纤维素(NC)膜可能对病毒有吸附。 - 取出4℃存放的病毒浓缩液,按照1份病毒浓缩液(3X)和2份病毒上清液的比例混合。上下颠倒充分混匀后,在4℃孵育6~8小时。4℃孵育充分后通常溶液会变浑浊。更长的孵育时间(如4℃过夜),有助于提高病毒回收率,但孵育时间不宜超过24h。
注意:
① 病毒浓缩液(3X)非常粘稠,需缓慢吸取,缓慢加入,并且一定要确保病毒浓缩液(3X)和病毒上清液两者充分混匀,才能确保病毒回收率。
② 病毒浓缩过程中须保持4℃,如果样品体积大,如超过100mL,建议更长的孵育时间。 - 4℃,7000×g离心0.5-1h。此时离心管底通常可见白色沉淀(有时沉淀不可见),小心吸除上清,切勿触及沉淀,不要剧烈晃动离心管。
- 4℃,7000×g离心1min,小心吸净少量的残留液体,切勿触及沉淀。
- 加入原病毒上清液体积的1~10%的病毒重悬液,静置10min,然后使用移液器小心吹打20~30次,重悬病毒沉淀。吹打时避免产生气泡,剧烈吹打可能导致病毒失活。
注意:
① 如果看不到明显的白色沉淀,就在沉淀可能形成的区域用移液器小心吹打。
② 白色沉淀的多少并不代表病毒量的多少。白色沉淀中除病毒颗粒外,还有血清蛋白和少量的细胞碎片和基因组DNA等。
③ 病毒重悬液:客户可根据具体实验需求自行准备。 - 4℃ 12000×g离心3~5min,吸取上清即为浓缩的病毒。可以根据后续的实验需要,适当分装后-80℃冻存备用。本步骤的离心沉淀物中包含血清蛋白和少量的细胞碎片和基因组DNA等。
相关搜索:通用型病毒浓缩液,病毒浓缩液,Universal Virus Concentration reagent,3X