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Triton-NH4OH细胞裂解液图片
产品货号:
KD1082
中文名称:
Triton-NH4OH细胞裂解液
英文名称:
Triton-NH4OH lysis buffer
产品规格:
100mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

保存:2~8℃

产品简介:
Triton-NH4OH细胞裂解液经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。本裂解液经过滤除菌,经过Triton-NH4OH细胞裂解液处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
本产品主要成分为Triton X-100(0.5%),NH4OH(20mM),PBS;经过过滤除菌处理。
使用说明:
组织细胞样品常规操作步骤:
1.制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2.裂解:加入3~5倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3.离心:4℃,离心5min,弃红色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5.洗涤:根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4℃,离心2~3min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6.如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
血液样本的常规操作:
1.取新鲜抗凝血,离心5min,弃上清。
2.裂解:加入6~10倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3.离心:4℃,400~500g离心5min,弃红色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5.洗涤:根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4℃,离心2~3min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
注意:对于微量或少量的血液样本,可以不用第1步操作,可直接加入10倍血液体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer进行第2步操作,并在4℃或室温裂解4~15min。
注意事项:
1.制备细胞悬液时应根据实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。
2.后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。
3.离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
4.常规步骤不快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
5.离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关搜索:Triton-NH4OH细胞裂解液Triton-NH4OH lysis buffer
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