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原位杂交是根据分子生物学核酸碱基互补原理，通过探针与细胞内特定的DNA或RNA在样本上进行杂交，从而将细胞内含有某种基因信息的DNA或其表达产物mRNA变为可见反应的一种技术。放射自显影可以用来显示杂交情况，KodakF-5定影液又称酸性坚膜定影液，主要由硫代硫酸钠、亚硫酸钠、硼酸等组成，溶解于蒸馏水或去离子水即可，用于组织切片的放射自显影时的定影。

• 曝光、显影、定影步骤均应在严密的避光环境中进行。
  
• 配制Kodak F-5定影液时应前一种试剂充分溶解后再加入后一种，否则易导致浑浊，显影效果不佳。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 配制Kodak F-5定影液：取加入800mL蒸馏水于1L烧杯中，加热至50℃，按上述A、B、C、D、F顺序依次加入试剂，同时充分搅拌，每加一种至完全溶剂后，再加下一种试剂。最后补水至1000mL，4℃避光保存。
  
• 曝光：X光片暗盒中4～6℃密闭曝光，曝光时间根据观察仪器不同而不同，光学显微镜一般2～6周，电子显微镜一般数月。
  
• 显影：参照显影液说明书操作。立即置于停显液或蒸馏水中水洗。
  
• 定影：置于预先加温至16～24℃的恒温Kodak F-5定影液内，定影时间要根据实验具体条件而定。
  
• 在自来水中冲洗2～5min，以充分洗去各种残留溶液和试剂。染色，封片。