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BoGel TBE-Urea PAGE预制胶主要用于20～800个碱基长度的RNA或单链DNA的高分辨率电泳分析或纯化，广泛用于合成寡核苷酸的分析和纯化、RNase保护试验(RPA)、体外转录研究和Northern印迹分析等实验。本预制胶有1.5厘米高的浓缩胶，具有非常优良的分离效果，电泳后RNA或单链DNA条带平整、清晰、细腻、锐利，几乎没有边缘效应；本预制胶胶板为玻璃材质，电泳效果非常好，达到甚至超过了自配TBE-Urea PAGE胶的电泳效果。本预制胶含有1.5厘米高的4%浓缩胶，可以有效确保获得非常锐利的条带。

BoGel TBE-Urea PAGE预制胶由高纯度的Tris、硼酸、EDTA、尿素等试剂制备，缓冲能力强，适合长时间电泳，且分辨率高、分离效果佳。严格的质量控制可确保凝胶和缓冲液中无DNase和RNase。

本预制胶使用常用的TBE电泳液，推荐使用1×TBE粉剂、5×TBE粉剂以及TBE缓冲液，或参考使用说明自行配制相应的电泳液。

• 本制品使用安全、便捷。本预制胶无需配制，即开即用，去掉梳子即可上样，而传统的TBE-Urea PAGE配制凝胶繁琐费时，并且制胶时还会接触有毒和刺激性试剂。
  
• 本制品质量稳定。本预制胶采用高品质玻璃胶板，和塑料胶板相比，大大减少了胶板对核酸的吸附，电泳效果更好。本制品流水线灌注，品质稳定可靠，重复性好，不同批次的产品一致性高。
  
• 本制品电泳效果好。本预制胶的核酸分离效果极佳，核酸条带平整、清晰、细腻、锐利。
  
• 本制品电泳槽兼容性好。本预制胶兼容市场上主流的小型电泳槽，如Bio-Rad公司的Mini-PROTEAN Tetra Cell电泳槽、Life公司的XCell SureLock Mini-Cell电泳槽(需与特制挡板配合使用)、以及上海天能、北京六一等的mini胶电泳槽或其它胶板宽度在10厘米的电泳槽。
  
• 本制品电泳时间短。本预制胶推荐的电泳电压和电泳时间为150V 50～90分钟，即可完成电泳并获得非常平整和锐利的电泳条带。具体的电泳时间取决于凝胶浓度。
  
• 本制品取出凝胶极为便捷。只需用刀片在玻璃胶板一侧轻轻划一下即可，并且玻璃胶板打开极为方便，无需特殊的起撬工具。

在核酸电泳实验中，常用的有两种凝胶：琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。与琼脂糖凝胶相比，聚丙烯酰胺凝胶具有更高分辨率和灵敏度、低本底染色、所需样品量较少、高效印迹、易于从凝胶中提取DNA、不干扰酶反应以及准确性和可重复性高等优点。常用于核酸电泳的PAGE凝胶有TBE PAGE凝胶、TBE-Urea PAGE凝胶和EMSA PAGE凝胶。其中，TBE-Urea凝胶主要用于变性核酸分析(RNA或单链DNA的分析和纯化)，常应用于合成寡核苷酸的分析和纯化、RNase保护实验(RPA)、体外转录研究和Northern印迹分析等实验。

• 由于本预制胶保质期较短，需新鲜制备，在您确认订购后约5个工作日才能发货。
  
• 对于RNA样品的电泳，按照下面方法配制1×TBE电泳液：将5×TBE电泳缓冲液用DEPC水稀释至1×，例如200mL 5×TBE电泳缓冲液中加入800mL DEPC水混匀后即为1×TBE电泳缓冲液。
  
• 本预制胶不能置于0℃以下冷冻，否则凝胶会冻裂。。
  
• 电泳液建议新鲜配制，试剂纯度不够、反复使用或长期放置的缓冲液会降低电泳效果。电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲性能下降，可能使电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。
  
• 本预制胶为了兼容几乎所有厂家的小型凝胶电泳槽，所以改进了与电泳槽U型硅橡胶密封条的吻合结构(如Bio-Rad等公司的电泳槽)。建议在电泳时须将具有突起结构的U型硅橡胶密封条取出后反过来安装，使其没有突起的平滑面朝外，从而防止漏液，见下图。一般内槽电泳液加满，外槽电泳液没过电泳槽底部的阳极即可，并且电泳结束后的电泳缓冲液可以作为外槽缓冲液重复使用1～2次。另外，部分公司都已经配套无突起结构的U型硅橡胶密封条，使用这样的U型硅橡胶密封条就不会出现内外槽之间的漏液现象。
  
  图1.Bio-Rad等公司的电泳槽U型硅橡胶密封条的突起结构图。由于百奥莱博的BoGel PAGE预制胶的该部位是平的，使其兼容几乎所有厂家的小型胶电泳槽，所以电泳时须将具有突起结构的硅橡胶密封条(左图)取出后反过来安装(右图)，使其没有突起的平滑面朝外，从而防止漏液。
  
• 由于百奥莱博的BoGel PAGE预制胶比Life公司的XCell SureLock Mini-Cell电泳槽配套的NuPAGE Gel或Novex Mini Gel略薄，所以需加特制挡板配合使用。如有需要，请在订购本制品时告知，百奥莱博会免费赠送该特制挡板。

• 样品准备：RNA或单链DNA样品加入等量2×RNA上样缓冲液或其它2×TBE-Urea Sample Buffer，70℃孵育5分钟以充分或适度变性核酸以打开核酸的二级结构，立即置于冰水浴中。
  • BoGel TBE-Urea PAGE预制胶的分辨率非常高，样品上样量需求显著低于琼脂糖凝胶，一般为琼脂糖凝胶的10%左右，建议每孔0.2μg左右即可。但如果后续实验目的是为了切胶回收目的DNA，可以根据需要加大上样量。
• 预制胶、电泳液的准备：
  
  • 将BoGel TBE-Urea PAGE预制胶从包装袋中取出。
    
  • 将预制胶固定在电泳槽中，平稳、缓慢地拔出梳子。
    
  • 配制1×TBE电泳缓冲液。推荐使用我司的1×TBE粉剂、5×TBE粉剂以及TBE缓冲液。1×TBE中含有89mM Tris-Borate、2mM EDTA，pH8.3。对于RNA样品的电泳，按照下面方法配制1×TBE电泳缓冲液：将5×TBE电泳缓冲液用DEPC水稀释至1×，例如200mL 5×TBE电泳缓冲液中加入800mL DEPC水混匀后即为1×TBE电泳缓冲液。
    
  • 内槽加满电泳液，外槽加入电泳液没过电泳槽底部的阳极即可。
    • 由于预制胶孔中有残留的储存缓冲液，所以建议用1mL移液枪吸取电泳液轻轻吹打加样孔，将加样孔冲洗干净，去除气泡和残留的储存缓冲液，这样电泳的效果更佳。
• 上样：将10μL吸头的尖端垂直方向轻轻插入到上样孔中即可上样，吸头避免戳破凝胶，更不能使胶板变形导致样品泄漏。推荐使用小RNA Ladder(10～50nt)。
  
  • 最佳上样量须通过实验来确定，样品过量较易导致条带拖尾和信号过强。
• 将电泳槽盖子盖好，并将电源线插头插入电泳仪电源插孔(红对红，黑对黑)。一般在150V电压，电泳50～90分钟左右即可，电泳至蓝色染料溴酚蓝至胶的下缘1/4处或其它合适位置，停止电泳。实际电泳时间与电泳液质量、凝胶的浓度和数量等因素有关系，需自行适当调整。
  
• 取出玻璃胶板，将刀片从玻璃胶板一侧轻轻划一下，稍加用力慢慢扳开或用刮板轻轻撬开玻璃胶板，用刮板将凝胶取出。
  
• 染色：将凝胶放至洁净容器内(例如适当大小的玻璃培养皿)，用DEPC水清洗1～2分钟，加入适量的核酸染色液，确保至少盖住凝胶。在摇床上缓慢摇动(30～50rpm)染色10～30分钟。用超纯水或TBE洗涤1～3次，每次3～5分钟，即可使用凝胶成像设备观察电泳后的染色结果。洗涤次数越多，时间越长，背景染色会越浅，但洗涤次数过多或时间过长，也会导致核酸条带的染色变弱。核酸染料推荐使用NadRed，稀释时须使用DEPC水。

• 电泳示踪染料溴酚蓝扭曲、电泳条带大幅扭曲、电泳时间大幅度延长：
  可能原因是内槽缓冲液泄漏而导致。建议重新夹一下胶板，防止在电泳过程中内槽液面逐步降低。
  
• 使用自己配制的电泳缓冲液与上样缓冲液电泳后条带较模糊：
  缓冲液配制不当，或长期放置变质，都会对本预制胶的蛋白电泳效果产生影响。推荐使用我司的1×TBE粉剂、5×TBE粉剂以及TBE缓冲液。
  
• 在上样时不可将吸头过度插入上样孔中，吸头的过度插入会使胶板变形，导致样品泄漏。