加入收藏
百奥莱博公司客服电话百奥莱博QQ百奥莱博QQ百奥莱博QQ
百奥莱博公司微信服务号

产品目录

绿色核酸电泳染料(BalbAIE NadGreen)图片
产品货号:
YTB1057
中文名称:
绿色核酸电泳染料(BalbAIE NadGreen)
英文名称:
BalbAIE Nucleic Acid Green
产品规格:
1mL|5mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:

本制品是一种溴化乙锭的升级换代产品,用于凝胶中单链或双链DNA、RNA等核酸的染色。BalbAIE NadGreen相对于NadGreen,使用方法完全一致,但其灵敏度更高,检测限低至pg级别,且条带的分离效果更好。同时,BalbAIE NadGreen也可以使用NadRed或Redye的紫外检测体系进行检测,但荧光亮度会弱一些。


BalbAIE NadGreen是一种基于聚集诱导发光荧光材料的三苯胺衍生物,具有典型的AIE特性。该染料具有较宽的激发光谱特性,因此极具兼容性,适用于原先使用SYBR Green或SYBR Gold为核酸染料的凝胶成像和检测系统。



产品特点:
  • BalbAIE NadGreen可大大降低条带的拖尾和弯曲,条带更清晰、更均匀、背景更低。常规的NadGreen可能存在一定程度的条带拖尾、弯曲、背景高等现象,BalbAIE NadGreen基本解决了这些问题,而且分子量大的条带也可得到较为完美的分离效果。
  • BalbAIE NadGreen比EB或SYBR Green更安全。BalbAIE NadGreen在远高于其工作浓度范围时均没有细胞毒性及诱变性。艾姆斯氏试验结果表明,BalbAIE NadGreen无致畸性且生物相容性优异。其和百奥莱博的NadRed、NadGreen系列产品一样,由于它们特殊的化学结构使其难以进入细胞,从而大大降低甚至避免了染料的致突变性和细胞毒性。而SYBR Green染料可以穿透细胞膜,进入活细胞并染色DNA。并且有报道SYBR Green可以强烈增强紫外线诱导的基因突变。
  • BalbAIE NadGreen检测灵敏度高,对于小分子量核酸的染色效果好。BalbAIE NadGreen在检测低浓度、微量DNA、ssDNA或RNA方面比EB更佳,尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏,检测限低至pg级别。BalbAIE NadGreen在紫外凝胶成像系统中的灵敏度高于NadGreen Plus。在使用浸泡染色法时,BalbAIE NadGreen和SYBR Gold的灵敏度相近甚至更高;与SYBR Gold不同的是,BalbAIE NadGreen预先配制在凝胶中也有很高的灵敏度。EB对于小分子量核酸染色效果差,而BalbAIE NadGreen对于小分子量核酸的染色效果很好,便于观察酶切或PCR获得的小分子量核酸片段。
  • BalbAIE NadGreen的稳定性好,染色重复性高。含SYBR Green的凝胶核酸染色的重复性比较差,通常是由于SYBR系列染料的稳定性差导致的。而BalbAIE NadGreen的稳定性很好,可以室温长时间保存及使用微波炉加热。BalbAIE NadGreen的光稳定性良好,可以在室内正常光线下操作而无需避光。由于其热稳定性和光稳定性,含BalbAIE NadGreen的凝胶在核酸染色时的重复性非常好。
  • BalbAIE NadGreen可以使用和SYBR Green或EB相同的检测体系。BalbAIE NadGreen具有和SYBR Green或SYBR Gold几乎相同的光学性质,两者的激发光和发射光都非常接近,这样可以直接用BalbAIE NadGreen替换SYBR Green,以使用SYBR Green的凝胶观察、拍照或成像系统。对于原来用于EB染料观察的系统,可以考虑选用百奥莱博的NadRed系列染料来替代EB,但也可以使用没有致突变性的BalbAIE NadGreen来替代EB。使用BalbAIE NadGreen来替代EB,并且用EB的紫外检测体系时,检测灵敏度会比使用NadRed系列低约4~5倍。对于既可以观察EB也可以观察SYBR Green的具有紫外和蓝光两种激发光的凝胶成像系统,则推荐直接用BalbAIE NadGreen来替换EB。
  • BalbAIE NadGreen使用方法和EB一致。BalbAIE NadGreen可以按适当比例直接加入琼脂糖中配制成凝胶,也可以在电泳完毕后对凝胶进行染色。前者更加方便,而后者灵敏度要更加高一些。但由于BalbAIE NadGreen本身已经非常灵敏,通常采用把BalbAIE NadGreen直接配制在凝胶中就可以了。对于一些特殊的情况,如核酸样品量特别少的情况等,则可以考虑电泳后再对凝胶进行染色。
  • BalbAIE NadGreen对条带迁移几乎没有影响。使用BalbAIE NadGreen时,样品的上样量不影响条带美观,即使上样量很高,也可获得良好的条带分离效果。


产品组成:
组分1mL5mL
绿色核酸电泳染料(BalbAIE NadGreen)1mL5mL
说明书1份1份

保存:室温,避光,有效期1年。

注意事项:
  • 为确保使用的不是假冒的BalbAIE NadGreen,可以用细胞培养液把BalbAIE NadGreen稀释至1×,然后对培养的活细胞进行染色。随后在荧光显微镜下尝试用各种激发光观察,如果发现活细胞细胞核出现明显的荧光,则可以判定为假冒产品。如果各种激发光下活细胞均无荧光,则说明该核酸染料是不能进入活细胞的相对安全的染料。具有强致突变性的吖啶橙染色核酸后也呈现绿色荧光,但其可以染色活细胞,而BalbAIE NadGreen不会染色活细胞。
  • 使用蓝光灯来检测BalbAIE NadGreen染色的核酸胶时,需要注意避免使用一些实为紫外灯的假冒伪劣的蓝光灯,以减少紫外线对于核酸样品和人体的伤害。比较简单的判断方法是,对于EB或NadRed染色的核酸胶,蓝光灯照射后是不会出现荧光条带的,而仅对于BalbAIE NadGreen染色的核酸胶,蓝光灯照射后才会出现荧光条带。如果对于EB或NadRed染色的核酸胶照射后也能观察到荧光条带,则说明使用的蓝光灯实际为紫外灯。
  • 制备好的BalbAIE NadGreen琼脂糖凝胶,在4℃避光条件下通常可以保存3~5天。
  • BalbAIE NadGreen琼脂糖凝胶再次熔化使用时,为取得更好的观察效果,需要添加适量BalbAIE NadGreen。
  • 电泳之后的凝胶不建议重复使用。
  • 电泳后再使用BalbAIE NadGreen染色的凝胶一般不需要脱色,如果发现背景太高,可以使用不含核酸酶的水进行脱色处理。
  • 如果使用聚丙烯酰胺凝胶,请使用浸泡染色法染胶,并延长染色时间至30分钟~1小时。
  • 如果观察到条带弥散或者分离不理想,建议使用浸泡染色法染色以确认是否与染料有关。如果浸泡染色法染色后仍然出现类似的问题,说明与染料无关,请尝试以下方法:使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低染料的浓度、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。
  • 本制品兼容常用的电泳缓冲液,例如TAE和TBE。
  • BalbAIE NadGreen适用于约450nm或260nm激发的成像系统,如果使用普通的适用于NadRed或EB的紫外灯或成像系统(约300nm激发),也能较好地观察到荧光,但强度会略弱一些。
  • BalbAIE NadGreen不属于有毒有害物质,并通过了环境安全相关测试,相关废弃物无需特殊处理,可参考常规化学试剂进行处理。


使用方法:
BalbAIE NadGreen和EB (溴化乙锭)一样可以根据使用者的偏好或实验目的采用以下方法中的一种:
  • 琼脂糖凝胶中添加BalbAIE NadGreen:
    根据需要配制适当浓度(例如1~3%)的琼脂糖胶液。在琼脂糖完全融解后,适当冷却但又不会使琼脂糖凝固时,按照每100mL胶液加入50μL BalbAIE NadGreen的比例(2000:1)加入BalbAIE NadGreen。混匀后即可把琼脂糖胶液倒入制备凝胶的模具中。适当量的DNA、ssDNA或RNA在该胶中电泳后,用约500nm波长蓝光激发或相应的凝胶成像系统检测(也可以使用常规的紫外灯或紫外凝胶成像检测系统),就可以观察到明亮的核酸条带。
    BalbAIE NadGreen非常稳定,所以BalbAIE NadGreen可以像EB一样在琼脂糖凝胶液加热融解后但未凝固前加入并混匀,也可以在琼脂糖融解前加入然后再微波炉加热融解并混匀。

  • 电泳完毕后对琼脂糖凝胶染色:
    按照每100mL 100mM NaCl溶液或水中加入100~200μL BalbAIE NadGreen的比例(500-1000:1)加入BalbAIE NadGreen,配制成BalbAIE NadGreen染色液。把电泳完毕的琼脂糖凝胶放到适当的容器中,加入适量上述配制好的BalbAIE NadGreen染色液,确保至少盖住凝胶。在摇床上缓慢摇动(30~50rpm)染色20~30分钟。染色的时间根据胶的厚度而定,胶厚则染色时间需要长一些,胶薄则染色时间可以短一些。染色完毕后,在紫外灯下即可观察核酸条带。要观察到更为清晰的条带,可以在染色后用水漂洗1~2次,每次3~5分钟,以消除背景,然后用约500nm波长蓝光激发或相应的凝胶成像系统检测(也可以使用常规的紫外灯或紫外凝胶成像检测系统)。BalbAIE NadGreen染色液可以重复使用3次左右。BalbAIE NadGreen染色液也可以一次大量制备,在室温下避光保存,直至用完。对于核酸需要回收的情况,操作过程中需要注意避免核酸酶污染。


应用效果:
  • BalbAIE NadGreen的琼脂糖凝胶电泳图参考图1。
    绿色核酸电泳染料(BalbAIE NadGreen)

    图1.本制品用于DNA marker琼脂糖凝胶电泳的效果图。左图为凝胶在紫外条件下(UV mode,300nm左右波长)成像,右图为凝胶在蓝光仪(BluePAD mode,470nm左右波长)下成像。泳道1-3分别为DNA Ladder(100bp~10kb)上样5μL、3μL、1μL的电泳检测效果;泳道4-6分别为DNA Ladder(200bp~12kb)上样5μL、3μL、1μL的电泳检测效果。实际检测效果会因核酸样品种类和大小、电泳槽、核酸染料、电泳条件和手机或相机等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
  • 本制品用于活细胞染色的效果图参考图2。
    绿色核酸电泳染料(BalbAIE NadGreen)

    图2.本制品对HeLa活细胞染色效果图。图A为HeLa细胞在明场下的形态图;图B为BalbAIE NadGreen染色效果图。可见,BalbAIE NadGreen无法进入活细胞,细胞毒性极低。实测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

相关搜索:绿色核酸电泳染料(BalbAIE NadGreen)BalbAIE Nucleic Acid Green
首页 |  关于我们 |  联系我们 |  在线咨询 |  网站地图
北京百奥莱博科技有限公司 京ICP备14007103号-3