产品货号:
M20013
中文名称:
DNA电泳染料(SYBR Green I)
英文名称:
SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain,10000X
产品规格:
100μL|500μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
SYBR Green I是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型花青类核酸染料,毒性很低,使用安全。SYBR Green I最低可以检出20pg的double-stranded DNA(dsDNA) (254nm),灵敏度高于溴化乙锭(EB)检测方法。SYBR Green I还可以用于检测寡核苷酸,灵敏度同样高于EB。在采用琼脂糖电泳或聚丙烯酰胺电泳方法检测dsDNA时,SYBR Green I是最灵敏的荧光染料之一。
SYBR Green I与核酸结合后的最大吸收峰为490nm,另外,在紫外区290nm和380nm处也有吸收峰。在紫外透射光下与核酸结合后呈绿色荧光,最大发射波长为515nm,可使用可见光凝胶透射系统或紫外凝胶透射系统观测。
SYBR Green I用于电泳检测DNA时,既可在电泳前进行染色(预染法),也可电泳后再进行染色(后染法)。
组分 | 100μL | 500μL |
核酸凝胶染料(SYBR Green I) | 100μL | 500μL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃,避光,有效期1年。
- 本公司提供的SYBR Green I染料产品溶解于DMSO中,从冰箱取出后应恢复至室温,充分融化并混匀后使用。为了减少损失,开盖请先离心沉积至管底部。
- SYBR Green I染料对玻璃和非聚丙烯材料具有一定的亲和力,建议在稀释、储存、染色等使用过程中使用聚丙烯类容器。
- SYBR Green I检测single-strand DNA (ssDNA)和RNA时,其灵敏度有所下降。
- 采用常规用酒精沉淀核酸的操作即可将全部的SYBR Green I染料从双链核酸上去掉。
- SYBR Green I的致突变性明显比EB低得多,目前尚无关于SYBR Green I染料对人体的致突变性或毒性的数据,但仍是一种潜在的诱变剂,请注意防护。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 预染法:
- 制胶:根据需要配制适当浓度(0.8~3.0%)的琼脂糖胶液。在琼脂糖完全融解后,适当冷却但未凝固时,按照每100mL胶液加入10μL SYBR Green I的比例(10,000:1)加入SYBR Green I。混匀后即可把琼脂糖胶液倒入制备凝胶的模具中。
- 样品、Marker预染:将SYBR Green I与6×Loading Buffer按照1:9的比例混合(如5μL的染料与45μL的6×Loading Buffer混合),获得Loading Buffer预染液。将核酸样品和Marker分别与Loading Buffer预染液按5:1的比例混合,室温孵育3min左右。
- 含有SDS的Loading Buffer会影响电泳结果,建议使用不含SDS的Loading Buffer。
- 由于SYBR Green I灵敏度高,核酸样品量较大时可能会使条带分不清,所以建议品质较好的Marker和浓度较高的样品可以适当稀释后使用(一般2μL配制好的Loading Buffer预染液对DNA的有效承载量为100~500ng)。
- 含有SDS的Loading Buffer会影响电泳结果,建议使用不含SDS的Loading Buffer。
- 按常规方法上样电泳,电泳结束后即可在紫外或蓝光照射下观察。
- 制胶:根据需要配制适当浓度(0.8~3.0%)的琼脂糖胶液。在琼脂糖完全融解后,适当冷却但未凝固时,按照每100mL胶液加入10μL SYBR Green I的比例(10,000:1)加入SYBR Green I。混匀后即可把琼脂糖胶液倒入制备凝胶的模具中。
- 后染法:
- 按照常规方法进行电泳,不需要在制胶时加SYBR Green I。
- 用pH7.5~8.0的缓冲液(例如TAE、TBE或TE),按照一定比例稀释SYBR Green I (琼脂糖凝胶电泳按1:10000或2:10000的比例稀释;聚丙烯凝胶电泳按3:10000或4:10000的比例稀释),轻轻震荡混匀,即成染色液。染色液一周内,避光低温储存应至少可用4次。
- 将凝胶完全浸入染色液中,室温避光震荡染色30~60min。染色时间根据胶浓度及厚度确定,凝胶越厚或浓度越高,所需的染色时间越长。
- 染色结束后即可直接在紫外或蓝光照射下观察。
- 按照常规方法进行电泳,不需要在制胶时加SYBR Green I。
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