产品货号:
KD3856
中文名称:
EMSA试剂盒(化学发光法)
英文名称:
Chemiluminescent RNA EMSA Kit
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒使用非同位素的方法检测RNA-蛋白质的相互作用。将生物素标记末端的RNA与蛋白共孵育,随后在聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳并转移至尼龙膜上。通过HRP标记的链霉亲和素与化学发光底物检测生物素标记的RNA。
本试剂盒提供了RNA EMSA检测所需的结合缓冲液和上样缓冲液,及一些关键的相关试剂,可以实现非同位素的RNA EMSA检测。可以用于100个蛋白和探针的结合反应,并足够检测至少10块有生物素标记EMSA探针的膜。

| 包装 | 组分 | 规格 | 保存 |
| 包装一 | 10×EMSA Binding Buffer | 250μL | -20℃ |
| 5×Loading Buffer (Blue) | 500μL | ||
| 5×Loading Buffer (Colorless) | 500μL | ||
| Streptavidin-HRP Conjugate | 100μL | ||
| 包装二 | Blocking Buffer | 120mL×3 | 2~8℃ |
| 4×Wash Buffer | 100mL×3 | ||
| Equilibration Buffer | 100mL×3 | ||
| Supper ECL A | 50mL | ||
| Supper ECL B | 50mL | ||
| 包装三 | 生物素标记RNA阳性探针 | 60μL | -80℃ |
| 未标记RNA阳性探针 | 20μL | ||
| 阳性蛋白 | 40μL |
保存:按标签指示条件保存,有效期1年。

5×TBE、EMSA PAGE凝胶、紫外交联仪。

A、EMSA凝胶制备
1.配制20mL EMSA PAGE凝胶,以6% native-PAGE凝胶为例:按照下表顺序依次加入各种试剂,加入10% APS后需混匀,然后加入TEMED再次混匀,加入到制胶的模具中。避免产生气泡,并插上梳齿。
| 成分 | 用量 |
| 5×TBE | 2mL |
| DEPC treated-water | 13.78mL |
| 40% Acry/Bis dolution(37.5:1) | 3mL |
| 50%甘油 | 1mL |
| 10% APS | 200μL |
| TEMED | 20μL |
- 非变性胶的浓度取决于RNA和蛋白的大小,一般使用4%~6%的凝胶即可。
- 模具可预先用DEPC水冲洗干净。
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