TAE琼脂糖预制胶(10×10cm,3%,15孔)

产品货号：

GS5292

中文名称：

TAE琼脂糖预制胶(10×10cm,3%,15孔)

英文名称：

SimAga 3% TAE Precast Agarose Gel,15wells,10×10cm,5mm

产品规格：

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1～3天

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简要说明：

SimAga琼脂糖预制胶是一款安全、快捷、高性能的琼脂糖预制胶，加样后即可用于核酸电泳。产品质量稳定，使用方便快捷，显著提高实验效率。

产品特点：

质量稳定：特殊配方，全自动灌胶生产工艺，确保产品稳定性和重复性。
方便快捷：放入电泳槽加样通电即可电泳；托盘设计，方便拿取，直接拍照。
安全高效：预加无毒核酸染料，电泳条带敏锐清晰。

产品组成：

组分	规格
TAE琼脂糖预制胶(10×10cm,3%,15孔)	5T
说明书	1份

保存：2～8℃，切勿冷冻，有效期一年。

用户自备：

设备和耗材：移液器、电泳仪电源、水平式凝胶电泳槽、凝胶成像系统、枪头。
试剂：电泳缓冲液、上样缓冲液、DNA Marker、样品、ddH2O。
- 上样缓冲液推荐：6×甘油凝胶上样缓冲液VII
- 电泳缓冲液推荐：TAE缓冲液；TBE缓冲液

使用方法：

准备：撕开包装，取出预制胶，连同托盘一起放入电泳槽中。上样孔端为负极，然后向槽内加入0.5×TBE(或1×TAE)缓冲液至液面恰好没过凝胶表面。如样品孔内有气泡，应除去。后续电泳步骤如自制凝胶。
加样：DNA样品中加入上样缓冲液，混匀，用移液器将样品混合液缓慢加入被浸没的凝胶加样孔内。上样时需防止将加样孔底部凝胶刺穿。同样的操作方法加入Marker。上样量30～40μL。
电泳：接通电源，红色为正极，黑色为负极。DNA样品由负极往正极泳动(靠近加样孔的一端为负)。电压120～180V，电泳时间随电泳槽大小变化，电泳槽越大，电泳时间越长。
观察：电泳完毕，关上电源，取出凝胶，带托盘直接置于凝胶成像系统下观察电泳条带位置并拍照。凝胶内含有的无毒染料，具有与EB相同的光谱特性，可在UV及荧光(594nm)下观察拍照。
- 本制品预加最新无毒害核酸染料，无需在缓冲液中添加染料。电泳后可直接置于凝胶成像系统下拍照。染料对单链DNA或RNA的灵敏度低于双链DNA。
- 成像曝光参数：
  模式光源曝光时间
  反射 UV 1000ms
- 若需将胶取出，请用刀或任意扁平工具插入凝胶底部，将凝胶从U型托盘中挑起即可。
清洁：将实验过程中所用电泳设备清洗晾干并置于原位。

常见问题：

问题点	可能原因	解决方案
DNA条带模糊	DNA降解	实验过程避免核酸酶污染。
	电泳缓冲液陈旧	电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，PH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果，需更换新的电泳液。
	所用电泳条件不合适	电泳时电压不应超过20 V/cm，温度<30℃，巨大DNA链电泳，温度应<15℃，核查所用电泳缓冲液的缓冲能力，注意经常更换。
	染料见光易分解	4℃，避光低温保存。
	DNA上样量过多	减少凝胶中DNA上样量。
	DNA含盐过高	电泳前通过乙醇沉淀去除多余盐分。
	有蛋白污染	电泳前酚抽提去除蛋白。
	DNA变性	电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
不规则DNA带迁移	所用电泳条件不合适	电泳时电压不应超过20V/cm，温度<30℃，巨大DNA链电泳，温度应<15℃，核查所用电泳缓冲液的缓冲能力，注意经常更换。
不规则DNA带迁移	DNA变性	电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
带弱或无DNA带	DNA上样量不够	增加DNA上样量，聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度高，上样量可适当降低。
	DNA降解	实验过程避免核酸酶污染。
	DNA跑出凝胶	缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度。
	所用光源不合适	电泳结束后在300nm左右的UV下观察。不要使用波长为260nm或360nm的UV，否则检测灵敏度会降低。
DNA带缺失	DNA跑出凝胶	缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度。
	分子大小相近的DNA带不易分辨	增加电泳时间，核准正确凝胶浓度。
	DNA变性	电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
	DNA链巨大，常规凝胶电泳不合适	在脉冲凝胶电泳上分析。
电泳时DNA条带扭曲	配胶的缓冲液和电泳缓冲液非同时配制	同时配制，电泳缓冲液高出液面1～2mm即可。
电泳时DNA条带扭曲	电泳时电压过高	电泳时电压不应超过20 V/cm。

模式	光源	曝光时间
反射	UV	1000ms

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