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本制品含Taq DNA Polymerase、dNTP、Mg²⁺和Buffer缓冲体系的预混液，浓度为2×，DNA的甲基化大多使用亚硫酸氢盐来进行修饰，该过程易造成DNA的降解或片段化，影响PCR反应的扩增效率。本制品中Buffer体系的优化和dNTP、Mg²⁺浓度的调节，能有效提高转化后DNA扩增的稳定性和特异性。本制品中包含双抗修饰封闭的Taq酶，在常温条件下不具备酶活性，可有效抑制常温状态下非特异扩增的产生，并且本制品在PCR实验中具有耐盐、耐Mg²⁺和高保真等特性，大幅提高了实验操作的简便性。

• 使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
  
• 本制品置于-20℃避光保存，应避免反复冻融，否则可能导致产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。

• PCR反应体系
  

  成分	25μL体系	50μL体系
  2×Multiplex Probe Mixture(for bisDNA)	12.5μL	25μL
  Primer Mix(10μM each)	1μL	2μL
  Template DNA	X μL	X μL
  ddH2O	至25μL	至50μL

  • 通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1～1.0μM作为设定范围的参考。
    
  • 使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
    
  • 通常DNA模板的量以10～100ng基因组DNA或1～10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
• PCR反应程序
  

  步骤	温度	时间	循环
  预变性	95℃	30s	1
  变性	95℃	10s	45
  退火/延伸	60℃(依引物而定)	30s

  • 采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因导致信号较低或CT值较大的情况，可尝试三步法PCR扩增。