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本制品是一种采用最新封闭技术的Taq DNA Polymerase，适用于HotStart PCR。在70℃以下，酶的活性中心被完全封闭，有效抑制了聚合酶活性，并能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。在95℃条件下孵育5分钟后，酶的部分活性得以释放。随着热循环的不断进行，剩余的酶活会源源不断地释放出来，这就使得此酶克服了常规Taq酶容易出现平台期的弊端，其扩增效率大大提高。

本制品进行PCR扩增时，PCR产物3'末端附有一个“A”碱基，可直接用于T/A克隆。本制品具有扩增速度快、特异性好、稳定性好的特点，主要应用于对扩增产物要求量大的PCR和RT-PCR反应。

• 经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
  
• 经检测无外源核酸酶活性；
  
• PCR方法检测无宿主残余DNA；
  
• 能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

• 配制PCR反应体系
  

  成分	用量	终浓度
  10×PCR Buffer	5μL	1×
  dNTP Mix，10mM each	1μL	200μM each
  Forward Primer，10μM	2μL	0.4μM
  Reverse Primer，10μM	2μL	0.4μM
  Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μL
  SuperStar DNA Polymerase(5U/μL)	0.5μL	2.5U/50μL
  ddH2O	至50μL

  注意：
  
  • 可以在室温下配制反应液，最好将试剂置于冰上。引物浓度请以终浓度0.1～1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
    
  • 本制品的10×PCR Buffer中含有15mM镁离子。
• 设置PCR反应程序
  

  步骤	温度	时间	循环数
  预变性	95℃	5min	1
  变性	94℃	0.5～1min	25～35
  退火	50～68℃	0.5～1min
  延伸	72℃	1min
  终延伸	72℃	10min	1

  注意：
  
  • 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
    
  • 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本制品中所包含的SuperStar DNA Polymerase的延伸速率为1kb/min。
    
  • 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。