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本制品即用型2×PCR扩增预混合溶液，包含Hiper Capable AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase，dNTPs以及优化的缓冲体系，预混液中含有预先添加的电泳指示剂，PCR产物可直接进行电泳，扩增产物为平末端。本制品具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，反应体系只需加入引物和模板即可。另外，本制品还含有特异保护剂，使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。

• 配制PCR反应体系：
  

  成分	用量	终浓度
  2×平末端PCR预混液	25μL	1×
  模板	X μL	-
  正向引物(10μM)	2μL	0.4μM
  反向引物(10μM)	2μL	0.4μM
  ddH2O	至50μL	-

  • 在1×预混液含有2mM Mg²⁺和200μM的dNTPs。
    
  • 推荐模板用量范围为10～200ng；cDNA样本上样量范围不超过反应体系的1/10，推荐1～2.5μL。
    
  • PCR反应体系中引物终浓度的范围为0.2～1μM，推荐0.4μM。
• PCR反应程序：
  

  步骤	温度	时间	循环数
  预变性	98℃	30sec	1
  变性	98℃	10sec	30～35
  退火	60℃	5sec
  延伸	72℃	5～10sec/kb
  终延伸	72℃	2min	1

  • 退火温度推荐60℃，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为5sec，可以在5～30sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
    
  • 延伸时间推荐5sec/kb，也可根据需要，适当延长至10sec/kb。