产品货号:
SY0036
中文名称:
热启动Taq DNA聚合酶(含Taq酶抗体)
英文名称:
HotStart Taq DNA Polymerase
产品规格:
100U|500U|3000U
发货周期:
已停产
产品价格:
已停产
本制品是Taq抗体和Taq DNA Polymerase(货号:SY0024)的混合产品。Taq抗体与Taq酶具有很高的亲和力,高温50℃处理30 min,依旧可以封闭Taq酶的活性。本品在预变性温度下加热30秒完全失活,释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。
本制品适用于热启动PCR和qPCR。本品中的Taq DNA聚合酶是热稳定重组型DNA聚合酶,具有较高的模板亲和力,非常适合低拷贝模板的扩增。扩增产物具有3'-dA,可轻松克隆用于T载体。
产品组成:
保存条件:-20℃保存,有效期2年。
活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃,30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
PCR反应体系(50μl):
注意:
1)试剂使用:各组分使用前需充分融化混匀。
2)聚合酶浓度:推荐使用2.5 U/50μL。可以在1.25-5 U/50μL之间进行优化。
3)Mg2+终浓度:体系终浓度为2 mM。如有特殊需要,可用25mM MgCl2,以0.2-0.5mM为间隔向上摸索。
4)不同模板的推荐使用量(50μL反应体系):
PCR扩增程序:
注意:
1)退火温度和时间:温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为20sec,可以在10-30sec内调节。
2)延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb。
3)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。
4)扩增程序:本产品用于定量实验,可使用2步法程序扩增,去掉延伸步骤,退火和延伸合为一步,对应的时间常用30 sec或根据仪器型号设置,如Applied Biosystems 7300需用31 sec以上。
相关搜索:热启动Taq DNA聚合酶(含Taq酶抗体),HotStart Taq DNA Polymerase
本制品适用于热启动PCR和qPCR。本品中的Taq DNA聚合酶是热稳定重组型DNA聚合酶,具有较高的模板亲和力,非常适合低拷贝模板的扩增。扩增产物具有3'-dA,可轻松克隆用于T载体。
产品组成:
组分 | 100U | 500U |
HotStart Taq DNA Polymerase(5U/μl) | 20μl | 100μl |
HotStart Taq Buffer(含Mg2+、dNTP) | 1ml | 1ml×5 |
保存条件:-20℃保存,有效期2年。
活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃,30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
PCR反应体系(50μl):
组分 | 体积 | 终浓度 |
HotStart Taq Buffer(含Mg2+、dNTP) | 25μl | 1× |
模板DNA | 适量 | - |
正向引物(10μM) | 2μl | 0.4μM |
反向引物(10μM) | 2μl | 0.4μM |
Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 0.5μl | 2.5U/50μl |
ddH2O | 补水至50μl | - |
注意:
1)试剂使用:各组分使用前需充分融化混匀。
2)聚合酶浓度:推荐使用2.5 U/50μL。可以在1.25-5 U/50μL之间进行优化。
3)Mg2+终浓度:体系终浓度为2 mM。如有特殊需要,可用25mM MgCl2,以0.2-0.5mM为间隔向上摸索。
4)不同模板的推荐使用量(50μL反应体系):
模板种类 | 模板使用量 |
基因组DNA | 50ng-200ng |
质粒DNA | 100pg-20ng |
cDNA | 1-5μL(不超过反应体系的1/10) |
PCR扩增程序:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 1 min | 1 |
变性 | 95℃ | 10 sec | 35-40 |
退火 | 60℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
终延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |
注意:
1)退火温度和时间:温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为20sec,可以在10-30sec内调节。
2)延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb。
3)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。
4)扩增程序:本产品用于定量实验,可使用2步法程序扩增,去掉延伸步骤,退火和延伸合为一步,对应的时间常用30 sec或根据仪器型号设置,如Applied Biosystems 7300需用31 sec以上。
相关搜索:热启动Taq DNA聚合酶(含Taq酶抗体),HotStart Taq DNA Polymerase