产品货号:
SY0031
中文名称:
热启动PCR Genotyping Mix(含染料)
英文名称:
2×Hiper HotStart PCR Genotyping Mix(With Dye)
产品规格:
1mL|5mL|50mL|100mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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2×Hiper HotStart PCR Genotyping Mix(含染料)是即用型的PCR预混合溶液,主要应用于小鼠基因型鉴定。
本制品含有Hiper HotStart Taq DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化了实验的操作步骤,可以高通量操作并提高实验结果的重现性。
Hiper HotStart Taq DNA Polymerase是经过配体修饰的热稳定Taq DNA Polymerase,该配体可以随温度变化来调节DNA聚合酶活性。在室温下酶活性被完全封闭,经95℃加热后活性才被释放。Hiper HotStart DNA Polymerase的激活时间只需要2~3min,兼容现有的PCR程序。本制品防止了在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增,可以有效地进行基因分型实验。
组分 | 1mL | 5mL | 50mL | 100mL |
2×Hiper HotStart PCR Genotyping Mix(含染料) | 1mL | 5×1mL | 50×1mL | 100×1mL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期2年。
- 核酸外切酶残留检测:20μL本品和0.6μg λDNA -HindIII,37℃下孵育4h,DNA的电泳谱带无变化。
- 核酸内切酶残留检测:20μL本品和1μg λDNA,37℃温育4h,DNA的电泳谱带无变化。
- 大肠杆菌残留DNA检测:50μL体系中,加入25μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。30个循环后扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
- PCR反应体系
注:成分 用量 终浓度 ddH2O 至50μL - 模板DNA 适量 - Primer正向(10μM) 2μL 0.4μM Primer反向(10μM) 2μL 0.4μM 2×Hiper HotStart PCR Genotyping Mix(含染料) 25μL 1× - 针对不同模板的最佳反应浓度有所不同,下表为50μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。
模板类型 用量 基因组DNA 50ng~100ng 质粒DNA 100pg~20ng cDNA 1~5μL (不超过反应体系的1/10)
- 针对不同模板的最佳反应浓度有所不同,下表为50μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。
- PCR扩增程序
步骤 温度 时间 循环数 预变性 95℃ 5min 1 变性 95℃ 30sec 35 退火 50~60℃ 30sec 延伸 72℃ 30sec/kb 终延伸 72℃ 10min 1
注:- 退火温度和时间:退火温度推荐使用50~60℃。退火时间推荐设置为30sec,可以在20~30sec内调节。可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。
- 延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30~60sec/kb。
- 扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。
- 退火温度和时间:退火温度推荐使用50~60℃。退火时间推荐设置为30sec,可以在20~30sec内调节。可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。
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