产品货号:
SN0042
中文名称:
2×BB Taq PCR Mix(不含染料)
英文名称:
2×BB Taq PCR Mix(without dye)
产品规格:
5mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:
产品特点:
产品组成:
保存:-20℃,有效期1年。
注意事项:
使用方法:
常见问题:
相关搜索:2×BB Taq PCR Mix(不含染料),PCR扩增,PCR预混液,2×BB Taq PCR Mix(without dye)
本制品包含高纯度BB Taq DNA聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系,浓度为2×,只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增,可有效扩增3kb以内的DNA片段。体系中不含电泳指示剂,扩增完成后需加入DNA Loading buffer后再上样进行电泳检测。使用本制品扩增的PCR产物3'端带有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于TA克隆。本制品适用于常规PCR扩增。
产品特点:
- 操作简单:2×Mix,只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增。
- 极快的延伸速度:10~15s/kb。
产品组成:
| 组分 | 规格 |
| 2×BB Taq PCR Mix(不含染料) | 1mL×5 |
| 说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期1年。
注意事项:
- 请使用高质量的模板进行扩增。
- PCR Mix应避免反复冻融,短期内多次使用可置于4℃保存。
- 本制品不可用于细菌16S鉴定。
使用方法:
- 按下表配制PCR反应体系(冰上操作)
成分 25μL体系 50μL体系 终浓度 2×BB Taq PCR Mix(不含染料) 12.5μL 25μL 1× 引物1(10μM) 1.0μL 2.0μL 0.4μM 引物2(10μM) 1.0μL 2.0μL 0.4μM 模板DNA 根据需要加入合适的量 ddH2O 25μL 50μL - - 模板推荐量:
- 以上为推荐的模板使用量,实际反应条件因模板、引物等的结构不同会存在一些差异,可根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系。
基因组DNA:10~1000ng;
质粒DNA:1~30ng;
cDNA:1~2μL(不超过PCR反应总体积的1/10)。 - 建议的PCR条件
步骤 温度 时间 循环数 预变性 95℃ 3min 1 变性 94℃ 25s 30~35 退火 55~64℃ 25s 延伸 72℃ 10~15s/kb 终延伸 72℃ 1~5min 1 - 4℃ Hold -
常见问题:
- 扩增无产物或产物量少?
- 模板降解或模板纯度差:电泳检测模板质量,使用高质量模板。
- 引物不合适:优化引物设计。
- 退火温度不合适:设置退火温度梯度,摸索合适的退火温度。
- 循环数过少:适当增加5~10个循环。
- 延伸时间不足:复杂模板可适当增加延伸速度至20~30s/kb。
- 模板降解或模板纯度差:电泳检测模板质量,使用高质量模板。
- 扩增出现非特异条带或弥散带?
- 引物特异性差:优化引物,避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增。
- 模板过量或纯度差:减少模板量,使用高质量模板。
- 退火温度过低:适当提高退火温度或使用Touchdown PCR程序。
- 循环数过多:减少循环数至25~30个循环。
- 引物特异性差:优化引物,避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增。
相关搜索:2×BB Taq PCR Mix(不含染料),PCR扩增,PCR预混液,2×BB Taq PCR Mix(without dye)
