产品货号：
SN0041
中文名称：
2×BB Taq MasterMix
英文名称：
产品规格：
5mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品特点：
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
使用方法：
常见问题：
相关搜索：2×BB Taq MasterMix，PCR扩增，PCR预混液
本制品包含Taq DNA Polymerase、dNTPs以及优化的缓冲体系，浓度为2×，只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增。本制品相对于普通Taq PCR Mix具有更高的产量及扩增性能，可有效扩增5kb以内的DNA片段。体系中包含有蓝色电泳指示剂，可在扩增完成后直接上样进行电泳检测，其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500bp双链DNA片段相近。使用本制品扩增的产物是混合末端，纯化后可用于平末端克隆，也可用于黏末端克隆。
产品特点：
- 操作简单：2×Mix，只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增。
- 扩增产量高：相对普通Taq PCR Mix具有更高的产量。
- 耐受性好：对抑制物有较好的耐受度。
- 适用性广：对多种模板均有良好的扩增性能。
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| 2×BB Taq MasterMix | 1mL×5 |
| 说明书 | 1份 |
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
- PCR Mix应避免反复冻融，短期内多次使用可置于4℃保存。
- 当产物产量较低时，可通过增加延伸时间或循环数来改善。
- 本制品不可用于细菌16S鉴定。
使用方法：
- 按下表配制PCR反应体系（冰上操作）
成分 25μL体系 50μL体系 终浓度 2×BB Taq PCR Master Mix 12.5μL 25μL 1× 引物1 (10μM) 1.0μL 2.0μL 0.4μM 引物2 (10μM) 1.0μL 2.0μL 0.4μM 模板DNA 根据需要加入合适的量 ddH2O 至25μL 至50μL - - 引物：扩增效果较差时，可在0.2～0.8μM范围内调整引物终浓度。
- 模板推荐量：基因组DNA(10～1000ng)，质粒DNA(0.1～30ng)，cDNA(1～2μL，不超过PCR反应总体积的1/10)。
- 引物：扩增效果较差时，可在0.2～0.8μM范围内调整引物终浓度。
- 建议的PCR条件
步骤 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 3min 1 变性 94℃ 30s 30～35 退火 55～64℃ 30s 延伸 72℃ 30s/kb 终延伸 72℃ 5min 1 - 4℃ Hold - 退火温度：参考引物Tm值，若上下游引物Tm相近，建议退火温度设置为引物中Tm较小值+3～5℃；若上下游引物Tm相差较大，建议退火温度设置为引物Tm的中间值；亦可采用梯度退火温度，筛选最适温度。
常见问题：
- 扩增无产物或产物量少？
- 模板降解或模板纯度差：电泳检测模板质量，使用高质量模板。
- 模板浓度过低：适当增加模板用量。
- 引物不合适：优化引物设计。
- 退火温度不合适：设置退火温度梯度，摸索合适的退火温度。
- 循环数过少：适当增加5～10个循环。
- 模板降解或模板纯度差：电泳检测模板质量，使用高质量模板。
- 扩增出现非特异条带或弥散带？
- 引物特异性差：优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增。
- 引物浓度过高：降低引物浓度。
- 模板过量或纯度差：减少模板量，使用高质量模板。
- 退火温度过低：适当提高退火温度或使用Touchdown PCR程序。
- 循环数过多：减少循环数至25～30个循环。
- 引物特异性差：优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增。
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