产品货号：
SN0040
中文名称：
2×BB Taq PCR mix
英文名称：
产品规格：
5mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
产品特点：
注意事项：
使用方法：
常见问题：
相关搜索：2×BB Taq PCR mix，PCR扩增，PCR预混液
本制品包含高纯度BB Taq DNA聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系，浓度为2×，只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增，可有效扩增3kb以内的DNA片段。体系中包含有蓝色电泳指示剂，可在扩增完成后直接上样进行电泳检测，其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500bp双链DNA片段相近。使用本制品扩增的PCR产物3'端带有一个突出的"A"碱基，纯化后可直接用于TA克隆。本制品适用于常规PCR扩增。
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| 2×BB Taq PCR mix | 1mL×5 |
| 说明书 | 1份 |
保存：-20℃，有效期1年。
产品特点：
- 操作简单：2×Mix，只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增；
- 极快的延伸速度：10～15s/kb。
注意事项：
- 请使用高质量的模板进行扩增；
- PCR Mix应避免反复冻融，短期内多次使用可置于4℃保存。
- 本制品不可用于细菌16S鉴定。
使用方法：
- 按下表配制PCR反应体系（冰上操作）
成分 25μL体系 50μL体系 终浓度 2×BB Taq PCR Mix 12.5μL 25μL 1× 引物1(10μM) 1.0μL 2.0μL 0.4μM 引物2(10μM) 1.0μL 2.0μL 0.4μM 模板DNA 根据需要加入合适的量 ddH2O 至25μL 至50μL - - 模板推荐量：基因组DNA：10～1000ng；质粒DNA：1～30ng；cDNA：1～2μL(不超过PCR反应总体积的1/10)。
- 以上为推荐的模板使用量，实际反应条件因模板、引物等的结构不同会存在一些差异，可根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系。
- 模板推荐量：基因组DNA：10～1000ng；质粒DNA：1～30ng；cDNA：1～2μL(不超过PCR反应总体积的1/10)。
- 建议的PCR条件
步骤 温度 时间 循环数 预变性 95℃ 3min 1 变性 94℃ 25s 30～35 退火 55～64℃ 25s 延伸 72℃ 10～15s/kb 终延伸 72℃ 1～5min 1 - 4℃ Hold -
常见问题：
- 扩增无产物或产物量少？
- 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板。
- 模板浓度过低。适当增加模板用量。
- 引物不合适。优化引物设计。
- 退火温度不合适。设置退火温度梯度，摸索合适的退火温度。
- 循环数过少。适当增加5～10个循环。
- 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至20~30s/kb。
- 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板。
- 扩增出现非特异条带或弥散带？
- 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增。
- 引物浓度过高。降低引物浓度。
- 模板过量或纯度差。减少模板量，使用高质量模板。
- 退火温度过低。适当提高退火温度或使用Touchdown PCR程序。
- 循环数过多。减少循环数至25～30cycles。
- 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增。
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