产品货号：
SN0039
中文名称：
热启动Taq DNA聚合酶
英文名称：
BB HotStart Taq DNA Polymeraset
产品规格：
500U|2500U|10000U
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
活性定义：
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
使用方法：
常见问题：
相关搜索：热启动Taq DNA聚合酶，PCR扩增，BB HotStart Taq DNA Polymeraset
本制品中的BB HotStart Taq DNA Polymerase是经过化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶。化学修饰后的酶在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模版非特异结合或引物二聚体而产生的非特异扩增，本制品中优化的4×HotStart Taq PCR Buffer缓冲体系使酶具有更高的扩增效率，可有效扩增3kb以内的DNA片段。使用本制品扩增的PCR产物3'端带有一个突出的"A"碱基，纯化后可直接用于TA克隆。本制品适用于常规PCR扩增。
活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位（U）。
产品组成：
| 组分 | 500U | 2500U | 10000U |
| BB HotStart Taq DNA Polymerase(5U/μL) | 100μL | 500μL | 2×1.0mL |
| 4×HotStart Taq PCR Buffer | 2×1.25mL | 10×1.25mL | 10×5.0mL |
| dNTP Mix(10mM each) | 200μL | 1.0mL | 4×1.0mL |
保存：-20℃，有效期1年。
注意事项：
- 请使用高质量的模板进行扩增。
- 本制品不可用于细菌16S鉴定。
使用方法：
- 按下表配制PCR反应体系（冰上操作）
成分 50μL体系 终浓度 BB HotStart Taq DNA Polymerase(5U/μL) 0.5μL 2.5U/50μL 4×HotStart Taq PCR Buffer 12.5μL 1× dNTP Mix(10mM each) 1μL 200μM each 正向引物(10μM) 2μL 0.4μM 反向引物(10μM) 2μL 0.4μM 模板 基因组DNA 10～1000ng - 质粒DNA 1～30ng cDNA 1～2μL ddH2O 至50μL - 以上为推荐的模板使用量，实际反应条件因模板、引物等的结构不同会存在一些差异，可根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系。 - 建议的PCR条件
步骤 温度 时间 循环数 预变性 95℃ 3min 1 变性 94℃ 25s 30～35 退火 55～64℃ 25s 延伸 72℃ 10～30s/kb 终延伸 72℃ 1～5min 1 - 4℃ Hold -
常见问题：
- 扩增无产物或产物量少？
- 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板。
- 模板浓度过低。适当增加模板用量。
- 引物不合适。优化引物设计。
- 退火温度不合适。设置退火温度梯度，摸索合适的退火温度。
- 循环数过少。适当增加5～10个循环。
- 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至20～30s/kb。
- 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板。
- 扩增出现非特异条带或弥散带？
- 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增。
- 引物浓度过高。降低引物浓度。
- 模板过量或纯度差。减少模板量，使用高质量模板。
- 退火温度过低。适当提高退火温度或使用Touchdown PCR程序。
- 循环数过多。减少循环数至25～30cycles。
- 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增。
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