产品货号:
RFT103
中文名称:
高效高保真DNA聚合酶
英文名称:
Taq plus DNA Polymerase
产品规格:
500U|2500U
发货周期:
已停产
产品价格:
已停产
Taq plus DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA Polymerase按照一定的比例混合而成,具有扩增效率高,错配率低的特点。与Taq DNA聚合酶相比,Taq plus DNA聚合酶具有扩增长度长,保真性好的优点;与pfu DNA聚合酶相比,具有扩增速度快,反应效率高的优点。此酶具有比Taq DNA聚合酶约3倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A,可以通过TA克隆法进行克隆。Taq plus DNA Polymerase适用于要求保真性和高效率的PCR反应,大多数情况下可以替代Taq DNA聚合酶。
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保存:-20℃,有效期一年。
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50mM Tris-HCl (pH8.0),0.1mM EDTA,1mM DTT,50mM KCl,Stabilizers,50% glycerol。
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10×Taq plus PCR buffer:
200mM Tris-HCl(pH8.4),200mM KCl,100mM(NH4)2SO4,20mM MgCl2。
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1单位是指在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
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M:DNA Marker
1:Rice PEPCase 8.6kb
2:Rice PEPCase 5.2kb
3:Rice PEPCase 3.2kb
4:pCMV-Myc 3kb
5:pCMV-Myc 2kb
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组分 | 500U | 2500U |
Taq plus DNA Polymerase(5U/μL) | 100μL | 5×100μL |
10×Taq plus PCR buffer(含Mg2+) | 1.8mL | 5×1.8mL |
保存:-20℃,有效期一年。
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10×Taq plus PCR buffer:
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1单位是指在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
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M:DNA Marker
1:Rice PEPCase 8.6kb
2:Rice PEPCase 5.2kb
3:Rice PEPCase 3.2kb
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- 按照下表在0.2mL PCR管中制备反应体系:
成分 用量 终浓度 Template 0.1~1μg as you wish Primer 1(10μM) 1μL 200nM Primer 2(10μM) 1μL 200nM 10×Taq plus PCR buffer 5μL 1× dNTP Mixture(10mM) 1μL 200μM each Taq plus(5U/μL) 0.5~1μL 2.5~5U ddH2O 至50μL - - 混匀后,离心快甩将反应液收集到管底。
- PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μL矿物油。
- PCR仪上执行以下程序:
步骤 温度 时间 循环数 初始变性 94℃ 1~5min 1 变性 94℃ 30sec 25~40* 退火 Tm-5℃* 30sec 延伸 72℃ 1min/kb 最后延伸 72℃ 5min 1
注*:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
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- Taq plus DNA polymerase能扩增多长片段?
对简单模板(如λ噬菌体做模板),可以扩增kb片段;对复杂模板(如基因组DNA),可以扩增kb片段。 - Taq plus DNA polymerase保真性怎样?
Taq plus含有3’-5’校对活性的聚合酶,有校对功能。保真性为普通Taq酶的3倍。 - 使用Taq plus DNA polymerase的扩增产物是否可以进行TA克隆?
由于使用Taq plus得到的PCR产物大多数带有A,可以进行TA克隆。 - Taq plus DNA polymerase可以扩增高GC含量片段吗?
Taq plus可以扩增高GC含量片段,建议使用Taq plus配合2×GC buffer(货号:RFT091)使用,而不建议使用10×Taq plus PCR buffer。
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