产品货号:
MT3205
中文名称:
热启动DNA聚合酶
英文名称:
HotStart AmpTaq DNA Polymerase
产品规格:
250U|5000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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HotStart AmpTaq DNA Polymerase为新一代DNA聚合酶,具有5’-3’外切酶活性,不具有3’-5’外切酶活性,其具有最高的杂质耐受性(对乙醇、胍盐、肝素具有极高的耐受性),因此对于纯度较差的DNA模板,该酶仍然可以获得理想的实验结果。除此外,AmpTaq DNA聚合酶是一种快速酶,该酶具有4kb/min的延伸速度,在快速qPCR中,10s的退火和延伸时间,即可完成片段的扩增和探针切割。
AmpTaq DNA聚合酶为高亲和力的核酸适配体封闭酶活性中心,因此在低温下Taq DNA聚合酶无活性,当温度升高到50℃,核酸适配体脱离酶活性中心,从而释放酶活。
组分 | 250U | 5000U |
HotStart AmpTaq DNA Polymerase(10U/μL) | 25μL | 500μL |
10×AmpTaq Buffer(with Mg2+) | 1mL | 20mL |
保存:-20℃,有效期2年。
10mM Tris-HCl(pH8.0),150mM NaCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,25% Sucrose。
- 经常使用置于4℃保存1个月。30次反复冻融,性能无下降。
- 10×AmpTaq Buffer(with Mg2+)中含有20mM Mg2+,该制品融化时,可能有白色沉淀,至于37℃ 5min后,白色沉淀可自行溶解,性能无改变。
- 本制品中不含甘油,可用于冻干PCR。
- 按照如下组分配制25μL PCR反应体系:
成分 用量 10×AmpTaq Buffer(with Mg2+) 2.5μL HotStart AmpTaq DNA Polymerase(10U/μL) 0.1μL dNTP Mixture (10mM each) 1μL PCR Forward Primer(10μM) 0.5μL PCR Reverse Primer(10μM) 0.5μL Probe(10μM) 0.25μL DNA模板 X μL ddH2O 至25μL - PCR扩增程序
- qPCR快速扩增程序用两步法:
步骤 温度 时间 循环数 Stage 1 95℃ 30s 1cycle Stage 2 95℃ 10s 25~40cycles 60℃ 10~15s - 常规PCR三步法程序:
步骤 温度 时间 循环数 Stage 1 95℃ 30s 1cycle Stage 2 95℃ 10s 25~40cycles 50~60℃(退火) 10s 72℃ 4kb/min Stage 3 72℃ 2min
- qPCR快速扩增程序用两步法:
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