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2×超高保真PCR预混液图片
产品货号:
MT3203
中文名称:
2×超高保真PCR预混液
英文名称:
2×G5S Plus HiFi PCR Mix
产品规格:
100T|1000T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品使用的G5S Plus High-Fidelity DNA Polymerase融合Q5和Q5U的性能于一体,使其成为一酶多用的全能选手。该酶来源于高保真DNA聚合酶,并加入了增强的延伸结构,使其具有超保真性能(与Q5同水平)、长片段扩增能力、高产量、dUTP渗入能力、扩增含有尿嘧啶模板的能力。使用该酶可轻松扩增8kb的基因组DNA、20kb的λDNA。该酶具有4kb/min以上的延伸速度。该酶具有5'-3'的聚合酶活性、强3'-5'的外切酶活性,产物为平末端。




  • 以λDNA为模板,扩增20kb DNA片段;
  • 以人类基因组DNA为模板,扩增8kb DNA片段。



组分100T1000T
2×HiFi Buffer1mL1mL×10
G5S Plus DNA聚合酶(2U/μL)20μL200μL

保存:-20℃,有效期2年。


  • 2×HiFi Buffer包含反应缓冲盐、dNTP、Mg2+、溴酚蓝等。
  • 引物、模板、酶浓度使用参考表
    在1×反应
    体系下
    引物浓度
    (nM)
    酶浓度
    (U/μL)
    模板浓度
    (ng/μL)
    <2kb2000.02基因组(0.01~1)
    简单模板(0.01~0.1)
    2~4kb1000.03基因组(0.05~2)
    简单模板(0.01~0.1)
    >4kb1000.04基因组(0.5~4)
    简单模板(0.05~0.1)
  • 扩增片段GC含量>60%时,推荐添加5×PCR增强剂(货号:MT0034)至1×浓度,来提升高GC含量的扩增性能。



  • 按下表加入各成分配制PCR反应体系:
    成分用量
    2×HiFi Buffer10μL
    G5S Plus DNA聚合酶(2U/μL)0.2μL
    上游引物(10μM)0.4μL
    下游引物(10μM)0.4μL
    模板DNAX μL
    ddH2O至20μL
  • 推荐的万能PCR扩增程序
    步骤温度时间
    <1kb1~2kb>2kb
    预变性95℃1min1min1min
    循环1
    (5个循环)
    95℃10s10s10s
    65℃30s45s30s/kb
    循环2
    (23个循环)
    95℃10s10s10s
    55℃10s10s10s
    72℃30s45s30s/kb
    终延伸72℃2min2min2min
    • 在实际应用中,引物TM值(50~70℃)范围内均获得良好的扩增。该程序扩增总循环数为28(5+23),如产物扩增亮度不足,则增加循环2的次数到25~28个,通常不宜超过28。
    • 如果仍然不能获得良好的扩增结果,则可以改变,循环2中的退火温度为50~65℃(上表中为55℃)。

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