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本试剂盒基于性能卓越的热启动Bst4.3 DNA/RNA聚合酶，用于模板DNA或RNA等温扩增反应，试剂盒中的Bst Buffer Mix包含解旋因子Uver、dNTPs、Mg²⁺、反应缓冲盐、冻干赋形剂和稳定剂等成分。

• 包含热启动Aptamer，该配体确保酶在<30℃时，酶活封闭效率>95%，在>60℃时1min内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系，并大幅降低了低温条件下的非特异扩增；
  
• 反应温度提升到70℃，大幅降低引物Dimer的形成，提高扩增特异性，并使得粗样品核酸释放更加充分；
  
• 本制品包含Uver，因此，允许在不使用F3/B3引物的情况下进行easy LAMP扩增，并允许FIP/BIP的引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增，并使得扩增均一性大幅提升。

本制品反复冻融10次不影响性能，但应避免反复冻融；制品由于含有高浓度的糖组分，-20℃保存的制品，在融化时可能会有结晶物。此时3.125×Bst Buffer Mix可在37℃进行彻底融化，而Bst4.3酶制品在30℃的温度下融化，过高的温度可能会导致热启动性能下降。一经融化推荐置于2～8℃保存，在此条件下制品稳定储存1个月。

• 热启动Bst4.3 DNA/RNA聚合酶在用于LAMP扩增时的推荐反应温度为70℃，最佳反应温度为70℃。
  
• 制品中包含高浓度的盐组分，使用时做好个人防护，防止制品与皮肤、眼、鼻、呼吸道等接触和吸入，一旦接触或吸入，请用大量的清水冲洗。
  
• 防止气溶胶污染，尽可能进行分区操作。
  
• 本品针对于具有冻干经验的研究者，可直接进行后续冻干，无需再加入任何其它辅料。

• 10×LAMP Primer Mix的配制
  

  	标准LAMP	easy LAMP
  FIP/BIP	16μM each	8～16μM each
  LF/LB	4～8μM each	4～8μM each
  F3/B3	2μM each	非必须

  • eLAMP（easy LAMP）为去除F3/B3引物的方法，为Bst4.3聚合酶专用的使用策略，对于大多数引物组，在Uver的加持下，扩增速度几乎不受影响。
• 配制LAMP反应体系
  

  成分	用量
  3.125×Bst Buffer Mix	8μL
  10×Primer Mix	2.5μL
  热启动Bst4.3 DNA/RNA聚合酶(16U/μL)	0.5μL
  模板DNA/RNA	X μL
  ddH2O	至25μL

• 反应体系配好后，置于70℃反应20～40min。

• 配制冻干体系：
  

  成分	用量
  3.125×Bst Buffer Mix	8μL
  25×Primer Mix	1μL
  热启动Bst4.3 DNA/RNA聚合酶(16U/μL)	0.5μL
  ddH2O	至9.5～10μL

• 制品成型后的冻干程序：-50℃预冻10min；-50℃ 4-8h（真空段）；-50℃升温到25℃（每小时升温5℃）；25℃ 2h；25℃恒温。