产品货号:
MT2801R
中文名称:
LAMP扩增预混液冻干球(ROY显色)
英文名称:
DNA/RNA ROY LAMP Bead
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是用于LAMP扩增的冻干微球制剂,内含恒温扩增所需的低盐缓冲盐、Mg2+、dNTP、Bst4.0 DNA/RNA聚合酶、pH变色染料ROY等,适用于RNA/RNA模板的等温扩增及可视化检测。
由于LAMP在反应时会产生大量的H+,导致反应体系pH下降,因此,低缓冲盐体系条件下,可搭配pH敏感染料ROY实现可视化的LAMP检测。该制品中包含低浓度的Tris(pH8.8)缓冲盐。
组分 | 规格 |
DNA/RNA ROY LAMP Bead | 100粒 |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期2年。室温可稳定保存6个月。
- 红黄变色反应依赖于反应体系中pH的变化来实现,因此模板中Tris盐、NaOH等成分对反应有至关重要的影响。在采用核酸纯化的样本检测时,推荐使用ddH2O进行洗脱。
- 关于DEPC水使用的特殊说明:由于DEPC处理过的ddH2O显示很强的酸性,会直接导致溶解后的冻干球成黄色。所以DEPC处理过的H2O必须经NaOH溶液调整pH到8.0~9.0后方可使用。我们推荐直接使用,水机制备的18.2Ω H2O,不影响RNA样本的扩增。
- 在对粗制样本进行检测时,最佳的粗制样本为拭孖样本,拭孖样本经ddH2O浸泡后,可以直接使用浸泡液作为模板进行扩增,无需核酸纯化步骤。
- 关于LAMP成品试剂的建议,DNA/RNA ROY LAMP Bead为室温稳定状态,可长期保存。将扩增引物于70℃烘干,再加入一粒冻干球即可制备成全体系检测试剂。
- 配制反应体系
成分 用量 DNA/RNA ROY LAMP Bead 1粒 10×LAMP Primer Mix 2.5μL 模板DNA/RNA X μl ddH2O 至25μL - 10×LAMP Primer Mix的配制,FIP/BIP分别为16μM、LoopF/B分别为4~8μM、F3/B3分别为2μM。引物的稀释液均使用ddH2O(pH8.0~9.0),不能使用含有Tris缓冲盐系统。由于该变色方法对pH敏感,多数情况下引物溶解后成酸性,因此在10×引物中加入终浓度1mM NaOH使引物恢复到中性pH(~8.5),注意NaOH需新鲜配制,可配制成50~100mM浓度使用。
- 盖上管盖,置于65℃进行反应20~30min。
- 肉眼观察结果,黄色为阳性,红色为阴性。
相关搜索:LAMP扩增预混液冻干球(ROY显色),LAMP预混液,RT-LAMP,恒温扩增,等温扩增,DNA模板,RNA模板,ROY显色,Bst4.0,DNA/RNA ROY LAMP Bead