产品货号：
MT2701
中文名称：
耐热LAMP扩增试剂盒(ROY变色)
英文名称：
Hot ROY LAMP Kit
产品规格：
100T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒基于耐热的Bst7.0 DNA聚合酶，用于DNA模板的LAMP高效扩增反应，应用可视化扩增显色染料，扩增完毕后阳性样品为黄色，阴性样品为红色。
Bst 7.0 DNA聚合酶为经重构架设计保留了Bst DNA聚合酶的链置换活性，并提高了其温度耐受性，该酶可以耐受85℃加热。这种短暂的高温耐热性能，具有以下几个优点。
- 在高温85℃加热2min后，可以将双链DNA进行变性，提高了引物的结合能力，从而提高LAMP检测的灵敏度。
- 在未经处理的检测样本中，可实现扩增反应同时裂解样本（从组织中释放DNA），从而实现核酸免提取的LAMP扩增。
- 在高温条件下打开引物的非特异性结构，明显降低LAMP反应的非特异性扩增。
- 短暂的高温可瞬时灭活病毒，降低检测样品的生物安全性。除此外，Bst7.0 DNA聚合酶中不含有甘油成分，因此可用于建立LAMP引物mix与酶制品的冻干品，以提高LAMP检测制品的稳定性和易用性。除此外，该制品还可以用于其它恒温扩增实验，包括CPA、SMAP等。
| 组分 | 规格 |
| Bst7.0 DNA聚合酶(3.2U/μL) | 250μL |
| 2×ROY Hot IsoAmp Buffer | 1mL |
保存：-20℃，有效期2年。短期保存置于4℃，可保存3个月，避免反复冻融。
- Bst7.0 DNA聚合酶中含22%海藻糖，不含甘油，可用于冻干。
- 关于矿物油的使用，在配制完LAMP反应体系后，可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部，以减少气溶胶的污染。
- 在用于其它恒温扩增反应时（如CPA、SMAP等），可参考如下策略进行使用，反应时间可能会需要调整。
- 向0.2mL EP反应管中加入各成分配制LAMP反应体系：
成分 用量 2×ROY Hot IsoAmp Buffer 10μL Bst7.0 DNA聚合酶(3.2U/μL) 2.5μL 10×LAMP Primer Mix 2μL 模板DNA(或粗样本) X μL ddH2O 至20μL - 10×LAMP Primer Mix浓度：FIP/BIP 16μM each、LoopF/B 4μM each、F3/B3 2μM each。
- 反应体系配好后，置于60～72℃（首次实验采用65℃）进行反应20～45min。
- 采用标准PCR仪作为反应设备时，还能采用灵敏度更高的加热方法进行LAMP反应。
温度 时间 85℃ 2min 60～72℃（首次实验采用65℃） 20～45min
- 采用标准PCR仪作为反应设备时，还能采用灵敏度更高的加热方法进行LAMP反应。
- 结果判定：扩增完毕后，肉眼观察，阳性样品为黄色，阴性样品为红色。
- ROY变色反应依赖于反应体系中pH的变化来实现，因此模板中Tris盐、NaOH等成分对反应有至关重要的影响。在采用核酸纯化的样本检测时，推荐使用ddH2O进行洗脱，在使用粗制样本时建议使用ddH2O保存的样本进行检测。
关于制品冻干：
- 引物及酶制品的冻干（可参考）
将该制品进行冻干处理，获得冻干品。成分 用量 Bst7.0 DNA聚合酶 2.5μL 10×LAMP Primer Mix 2μL 45%海藻糖 0.5μL 总体积 5μL - 冻干制品的LAMP扩增
向一份冻干品中加入10μL的2×ROY Hot IsoAmp Buffer溶解冻干制品，并加入最多10μL的检测DNA模板，总体积为20μL。进行LAMP扩增。
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