产品货号:
MT0029
中文名称:
Bst3.0 DNA/RNA聚合酶
英文名称:
Bst3.0 DNA/RNA Polymerase
产品规格:
1600U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品与Bst2.0 DNA聚合酶和Bst DNA聚合酶大片段相比,Bst3.0 DNA/RNA聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板,该酶都具有5'-3'的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性,但该酶5'-3'和3'-5'的外切酶活性缺失。
在以RNA为模板的LAMP实验中,可实现单酶系统反应。该酶在60~65℃之间具有很好的反转录活性,可有效解决具有二级复杂结构的RNA模板的反转录,而Bst2.0 DNA聚合酶和Bst DNA聚合酶大片段无此活性。
一个活力单位即在65℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
组分 | 规格 |
Bst3.0 DNA/RNA聚合酶(8U/μL) | 200μL |
10×Bst Buffer(Mg2+-free) | 1mL×2 |
100mM Mg2+ | 1mL×2 |
保存:-20℃,有效期3年。
- Mg2+的使用浓度为4~10mM浓度,本制品提供的Bst Buffer不含Mg2+,通常情况下,在6~8mM Mg2+条件下可获得较好的LAMP结果。
- 有文献报道加入Tte Uvrd解旋酶可改善LAMP的效果。
- 使用无模板DNA作为对照检测扩增的特异性。
- 按下表加入各成分分配制LAMP反应液
成分 用量 Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(8U/μL) 0.25~1μL 10×Bst Buffer(Mg2+-free) 2.5μL 100mM Mg2+ X μL dNTP Mixture (10mM each) 3.5μL 模板DNA/RNA 10ng~1μg 10×Primers 2.5μL ddH2O 至25μL - 10×Primers:16μM FIP/BIP,2μM F3/B3,4~8μM LpF/B each。
- 65℃反应30~60分钟
- 85℃加热5分钟失活Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶。
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