产品货号:
MT0027
中文名称:
phi29 DNA聚合酶
英文名称:
phi29 DNA Polymerase
产品规格:
1000U|20KU
发货周期:
已停产
产品价格:
已停产
phi29 DNA聚合酶是从嗜热脂肪芽孢杆菌Bacillus subtilis噬菌体phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶,在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。
phi29 DNA聚合酶具有特殊的链置换和连续合成特性,可连续合成长达70kb的DNA片段。另外,该酶具有3’→5’外切酶校读功能,合成的DNA片段保真性高。该酶的外切酶活性较强,因此合成过程中对引物3’端进行修饰,以降低外切活性对引物的切割效应尤为必要。
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组分 | 1000U |
phi29 DNA Polymerase(20U/μl) | 50μL |
10×phi29 Buffer | 1mL |
保存:-20℃,有效期3年。
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1×phi29 Buffer:
50mM Tris-HCl pH7.5,10mM MgCl2,10mM (NH4)2S04,4mM DTT。
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- 必要时可单独额外添加终浓度1mM DTT和0.2mg/ml BSA,可提高反应效率。
- 该酶的最佳反应温度为30℃。
- 65℃ 10min即可使该酶失活。
- 根据实验类型需要,调整dNTP的浓度100~500μM。
- 添加Yeast Pyrophosphatase(货号:MT0098)可提高DNA产量。
- 反应引物3’端的硫代修饰可避免引物降解。
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