产品货号：
MT0017
中文名称：
2×SYBR qPCR MasterMix
英文名称：
2×SYBR Green qPCR MasterMix
产品规格：
100T|500T|10000T
发货周期：
已停产
产品价格：
已停产
本品是采用SYBR Green嵌合荧光法进行Real-Time PCR的专用试剂，将化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶、反应Buffer、dNTP、SYBR Green染料等试剂预混在一起，是一种2X浓度的单组分预混试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单，只需加入引物、模板、水即可。
2×SYBR Green qPCR Mix中的DNA聚合酶为化学法修饰的Hot Start Taq DNA聚合酶，该酶在50℃以下100%无活性，只有95℃条件下加热15分钟后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性PCR扩增，极大的提高了PCR扩增特异性。该试剂盒独特的反应缓冲液，可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。
本品配有单独的ROX内参染料，使得该试剂可应用于所有RealTime PCR机型，包括：ABI 7000/7700/7900HT,7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)；LightCycler（Roche Diagnostics)；Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad&MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。
图：A-C为使用SYBR Green法检测10～107copy模板的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。D.重复性高，误差<±0.5Ct。
特点：
1．热启动酶采用化学修饰，100%热启动
2．单组份预混液，使用方便快捷
3．高特异性，有效抑制非特异性扩增
4．高灵敏度，可检测低丰度基因
5．适用于所有实时定量PCR仪器
产品组成：
储存：请避光置于-20℃或-70℃可保存3年。注：长期-20℃保存可能会出现沉淀，室温融化后混合均匀，不影响试剂性能。
注意事项：
1．2×SYBR Green qPCR Mix于-20℃保存时容易形成沉淀，可用手轻握或室温放置一段时间后，颠倒混匀待其完全融解后使用。
2．本制品请避光保存(短期6个月内使用可置于4℃)，使用频率低时置于-20℃，反复冻融会使制品性能下降。
3．配制反应液时，注意避免强光照射，并于冰上操作。
使用方法：
1．根据PCR仪选择步骤A或B
A：需要添加ROX染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR仪，包括：ABI PRISM7000/7700/7900HT,7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)等。按照如下组分配制20μl PCR反应体系：
B:无需添加ROX染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR仪，包括：LightCycler（Roche Diagnostics)；MiniOpticon、Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad & MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。按照如下组分配制20μl PCR反应体系：
2．进行Real-Time PCR反应，通常采用两步法，程序如下：
注意：由于该酶为化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶，必须于95℃加热15分钟才能恢复酶的活性，该热启动步骤不能缩短时间。
3．反应结束后确认Real-Time PCR的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。
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2×SYBR Green qPCR Mix中的DNA聚合酶为化学法修饰的Hot Start Taq DNA聚合酶，该酶在50℃以下100%无活性，只有95℃条件下加热15分钟后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性PCR扩增，极大的提高了PCR扩增特异性。该试剂盒独特的反应缓冲液，可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。
本品配有单独的ROX内参染料，使得该试剂可应用于所有RealTime PCR机型，包括：ABI 7000/7700/7900HT,7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)；LightCycler（Roche Diagnostics)；Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad&MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。
图：A-C为使用SYBR Green法检测10～107copy模板的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。D.重复性高，误差<±0.5Ct。
特点：
1．热启动酶采用化学修饰，100%热启动
2．单组份预混液，使用方便快捷
3．高特异性，有效抑制非特异性扩增
4．高灵敏度，可检测低丰度基因
5．适用于所有实时定量PCR仪器
产品组成：
| 组分 | 100T | 500T | 10000T |
| 2×SYBR Green qPCR Mix | 1ml | 1ml×5 | 100ml |
| 50×ROX Reference Dye | 200μl | 200μl | 4ml |
储存：请避光置于-20℃或-70℃可保存3年。注：长期-20℃保存可能会出现沉淀，室温融化后混合均匀，不影响试剂性能。
注意事项：
1．2×SYBR Green qPCR Mix于-20℃保存时容易形成沉淀，可用手轻握或室温放置一段时间后，颠倒混匀待其完全融解后使用。
2．本制品请避光保存(短期6个月内使用可置于4℃)，使用频率低时置于-20℃，反复冻融会使制品性能下降。
3．配制反应液时，注意避免强光照射，并于冰上操作。
使用方法：
1．根据PCR仪选择步骤A或B
A：需要添加ROX染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR仪，包括：ABI PRISM7000/7700/7900HT,7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)等。按照如下组分配制20μl PCR反应体系：
| 加入物 | 加入量 | 终浓度 |
| 2×SYBR Green qPCR Mix | 10μl | 1× |
| 50×ROX Reference Dye | 0.4μl | 1× |
| PCR Forward Primer(10μM) | 0.4~0.8μl | 0.2~0.4μM |
| PCR Reverse Primer(10μM) | 0.4~0.8μl | 0.2~0.4μM |
| DNA模板 | 0.5~2μl | |
| ddH2O | Up to 20μl |
B:无需添加ROX染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR仪，包括：LightCycler（Roche Diagnostics)；MiniOpticon、Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad & MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。按照如下组分配制20μl PCR反应体系：
| 加入物 | 加入量 | 终浓度 |
| 2×SYBR Green qPCR Mix | 10μl | 1× |
| PCR Forward Primer(10μM) | 0.4~0.8μl | 0.2~0.4μM |
| PCR Reverse Primer(10μM) | 0.4~0.8μl | 0.2~0.4μM |
| DNA模板 | 0.5~2μl | |
| ddH2O | Up to 20μl |
2．进行Real-Time PCR反应，通常采用两步法，程序如下：
| Stage 1: | 95℃ | 15分钟* | |
| Stage 2: | 95℃ | 10s | |
| 60℃ | 30s | 35~40 cycles | |
| Stage 3: | Dissociation analysis | ||
注意：由于该酶为化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶，必须于95℃加热15分钟才能恢复酶的活性，该热启动步骤不能缩短时间。
3．反应结束后确认Real-Time PCR的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。
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