产品货号:
M20038
中文名称:
2×快速PCR预混液
英文名称:
2X Fast PCR MasterMix(with Dye)
产品规格:
1mL|5mL|20mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是一款用于快速PCR扩增的2×浓度的即用型预混液,包含改造的Taq DNA Polymerase、强力延伸因子、扩增增强因子、dNTPs Mix、MgCl2以及优化的缓冲体系,扩增速度可达15sec/kb (1kb以内的极限扩增速度可达5sec/kb)。只需加入模板和引物即可快速高效完成PCR反应,减少操作过程中的污染几率。本品中已预混溴酚蓝染料,PCR反应后可直接进行电泳检测。使用本制品扩增得到的PCR产物3’端具备“A”尾,纯化后可直接进行T载体克隆。
组分 | 1mL | 5mL | 20mL |
2×快速PCR预混液 | 1mL | 5×1mL | 20×1mL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期1年。
- 使用前,请上下轻轻颠倒混匀,避免产生气泡,防止因混合不均匀造成的反应效果不佳。
- 反应液的配制,请在冰上操作完成。因为Taq DNA Polymerase在室温下也具有一定活性,冰上操作可以减少在反应准备阶段发生的非特异性扩增。
- 本制品PCR产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 配置反应体系
建议的模板量:基因组DNA,30~100ng;质粒DNA,0.1~10ng。
按下列组分配制PCR反应液(反应液配制请在冰上进行):成分 用量 2×快速PCR预混液 25μL PCR Forward Primer(10μM) 2.5μL PCR Reverse Primer(10μM) 2.5μL DNA模板 x μL ddH2O 至50μL - 2×快速PCR预混液中包含3mM Mg2+,适合大部分PCR反应。
- PCR仪程序设置
将上述配制的反应体系混合均匀后,置于PCR仪中进行反应,具体程序如下:温度 时间 循环数 94℃ 3~5min 1 94℃ 10sec 30~35 50~60℃ 20sec 72℃ 15~30sec/kb 72℃ 5min 1 - PCR反应条件(退火温度与延伸时间)在实际操作中需根据模板量、目的片段大小、碱基序列和引物长短等具体情况而设置。
- 退火温度参考引物的理论Tm值,可设置低于引物理论值1~2℃。
- 1kb以内的基因扩增速率可选择5~15sec/kb。
- PCR反应条件(退火温度与延伸时间)在实际操作中需根据模板量、目的片段大小、碱基序列和引物长短等具体情况而设置。
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