产品货号:
M20036
中文名称:
T4 DNA聚合酶
英文名称:
T4 DNA Polymerase
产品规格:
50U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
T4 DNA聚合酶具有5'→3'的DNA聚合酶活性,能够在拥有模板和引物的情况下,催化沿5'→3'方向DNA的合成。本酶还拥有单链DNA特异性的3'→5'的外切核酸酶活性,该活性比Klenow片段强100~1000倍,适用于3'突出端的切平。和DNA聚合酶I不同,本酶不具有5'→3'外切核酸酶的活性。
在37℃条件下,30分钟内能使10nmol的dNTPs渗入反应成为酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
组分 | 规格 |
T4 DNA Polymerase(5U/μL) | 10μL |
10×T4 DNA Polymerase Buffer | 1mL |
保存:-20℃,有效期1年。
- 使用时将酶置于冰上操作,使用完毕后-20℃保存。
- 需要Mg2+存在才能使酶发挥活性,金属离子螯合剂可抑制酶的活性。
- 反应体系中离子强度超过100mM时,活性将被抑制。
- 易受模板DNA高级结构影响,T4噬菌体基因32编码蛋白可以显著提高聚合酶活性,但3'→5'外切核酸酶活性则完全被抑制。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
DNA 3'突出末端的平滑化:
- 将试剂溶化后,在冰上配制如下反应体系:
成分 用量 模板DNA 0.1~4μg 10×T4 Polymerase Buffer 1μL dNTPs (10mM) 0.2μL ddH2O 至9μL - 70℃反应5分钟,防止DNA末端退火,然后置于37℃水浴锅中。
- 加入0.2μL T4 DNA聚合酶,轻轻混匀,保温5分钟。
- 用涡旋仪振荡搅拌可使酶失活,如果进行连接反应,最好立即进行。如果不立即进行,应立即进行苯酚/氯仿处理,乙醇沉淀后20℃保存。
相关搜索:T4 DNA聚合酶,DNA聚合酶,T4 聚合酶,T4 DNA Polymerase