产品目录

本制品用于从各种生物样品或相关材料中快速释放LAMP扩增用的DNA和RNA，适用于几乎所有的液体或实体生物样品（细菌、真菌、植物、动物、唾液、毛发、组织样品、石蜡组织切片）和相关材料（FTA卡、拭子等），一般均不需要任何前处理。

• 操作简单，只常温保温即可得到用做LAMP扩增用的DNA和RNA模板。
  
• 不需要离心和加热，适合野外现场操作。
  
• 制备的释放物同时含DNA和RNA，适用于基于Bst DNA聚合酶的LAMP和基于RTX-Bst的RT-LAMP，但用户需要自行通过引物设计来排除DNA和RNA的可能相互干扰。
  
• 环保健康，不使用任何有毒有害的试剂。
  
• 本制品足够处理100个样本，每次处理得到的释放物足够至少50次扩增。

• 对固体样本：将2～5mg剪得尽可能细的实体动物或植物组织转移到1.5mL塑料离心管中，加入50μL本制品，充分吹打混匀，常温放置10分钟裂解细胞得释放物，常温放置待用（不要放冰上）。未用完的释放物需要放-20℃（对DNA检测）或-80℃（对RNA检测）长期保存。
  
  本制品并不能释放所有核酸，只能释放出足够后续LAMP或RT-LAMP检测的核酸，故裂解结束后，还会有可见实体组织或微生物悬液，只取用液体即可。
  
  
• 对细胞数量确定的液体样本（如悬浮细胞、微生物培养物、动物白细胞等，如果是全血，最好先去除红细胞，只用白细胞，否则血红素将严重抑制扩增）：将含10⁵个悬浮细胞或微生物培养液在1.5mL塑料离心管中离心沉淀，弃上清，在沉淀中加入50μL本制品后充分吹打混匀，常温放置10分钟裂解细胞得释放物，常温放置待用（不要放冰上）。未用完的释放物需要放-20℃（对DNA检测）或-80℃（对RNA检测）长期保存。
  
• 对细胞数量不确定的液体样本（如尿液、唾液）：将1.5mL液体样本转移到1.5mL塑料离心管中离心沉淀，弃上清，在沉淀（含数量不确定的细胞）中加入50μL本制品后充分吹打混匀，常温放置10分钟裂解细胞得释放物，常温放置待用（不要放冰上）。未用完的释放物需要放-20℃（对DNA检测）或-80℃（对RNA检测）长期保存。
  
• 对含游离核酸的液体样本（尿液、唾液、环境水体、血清血浆、拭子洗脱液、生物材料洗脱液）：由于不能象处理细胞样本一样用常规沉淀来富集游离核酸，故这类样本只能直接处理。将25μL液体样本和50μL本制品混合，常温放置10分钟得释放物，常温放置待用（不要放冰上）。未用完的释放物需要放-20℃（对DNA检测）或-80℃（对RNA检测）长期保存。
  
• 样本稀释：由于本制品是广谱核酸释放剂，使用各种样本，它们含不同浓度的、性质各异的LAMP或RT-LAMP抑制物，故用释放液直接做扩增模板一般都不会得到成功扩增，一般都需要稀释不同倍数使抑制物浓度减低到不抑制扩增之后，靶分子才能成功扩增。对具体的样本，需要稀释多少倍必须先通过实验在首次使用本制品时确定。具体方法是准备5个不同稀释度的模板：释放物原液（第3步所得）、5倍稀释液（10μL原液加40μL超纯水）、10倍稀释液（10μL原液加90μL超纯水）、100倍稀释液（10μL 10倍稀释液加90μL超纯水）、1000倍稀释液（10μL 100倍稀释液加90μL超纯水）。
  
• 各取1μL进行LAMP或RT-LAMP扩增，确定样本最适稀释浓度。
  
  本制品得到的释放物可用于基于Bst DNA聚合酶的LAMP扩增或基于Bst DNA聚合酶-RTX逆转录酶的RT-LAMP扩增，是否适用于基于其他酶的LAMP或RT-LAMP体系需要用户自行测试。
  
  
• 后续实验均用上步确定的最佳稀释度进行稀释，然后进行LAMP扩增。如果第1步的起始材料用量改变或材料种类改变，则最佳稀释度需要按第5步重新确定。