产品货号:
KL230701
中文名称:
染料法DOP-PCR试剂盒
英文名称:
SYBR DOP-PCR Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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简并寡聚核苷酸引物PCR(DOP-PCR)是扩增全基因组的方法之一。它利用中间含有6个随机碱基的22nt引物,通过两轮PCR(第一轮低温复性,第二轮高温复性)而将模板DNA扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi 29 DNA聚合酶的MDA,但在扩增高度降解的痕量DNA方面具有巨大优势,在法医鉴定领域具有重要应用。本制品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发染料法DOP-PCR的。

- 专门用于高度降解的DNA,方便,含有除模板DNA和引物以外的所有成份,简化了准备工作。
- 反应体系中含义荧光染料,可以在不开盖的情况判断DOP-PCR扩增情况,比常规的电泳法检测更加方便。
- 优化的引物浓度,用户不需要自己摸索条件。
- 使用高保真酶,降低突变率。
- 产物长度在300~1700bp之间,平均500bp左右。
- 模板基因DNA用量一般为10~100pg。
- 所得PCR产物可用于后续STR多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱等实验。

| 组分 | 规格 |
| 染料法DOP-PCR MagicMix | 750μL |
| DOP-PCR引物(20pmol/μL) | 250μL |
| 超纯水 | 1mL |
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期1年。

- 在干净的PCR管中,分别加入下列成分:
成分 阴性对照 样品 染料法DOP-PCR MagicMix 25μL 25μL 基因组DNA模板(自备)或单个细胞 不加 10~100pg(或单个细胞) DOP-PCR引物(20pmol/μL) 5μL 5μL 补水到 50μL 50μL - 放入荧光定量PCR仪中按下列参数进行染料法DOP-PCR。
预变性 92℃ 2min 第一轮PCR(6个循环) 92℃ 1min 30℃ 1min 68℃(以每秒升0.3℃的速度升到68℃) 3min 第二轮PCR(设置30个循环,但在荧光信号达到平台期后立即手动停止扩增,一般在14次循环左右就可以到底平台期) 92℃ 0.5min 62℃ 0.5min 68℃ 3min,采集SYBR通道荧光信号 - 如果需要电泳回收,可以进行琼脂糖电泳。DOP-PCR产物的长度一般在300~1700bp之间。
- 所得DOP-PCR产物可以用于后续PCR检测或其他分析。
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