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本制品是以mRNA或者总RNA为模板，高效合成第一链cDNA。本制品含有反转录反应所需的全部试剂（BalbScript II反转录酶，RNase Inhibitor，Oligo(dT)18，Random N6，dNTPs）。反应时只需要加入RNA模板和水即可，操作简单，降低操作过程中的污染。制品中含有去基因组成分gDNA Purge，以RNA为模板进行cDNA第一链合成时，可以同步去除基因组DNA污染，反应结束后，75℃加热5分钟，就可以失活反转录酶，RNA酶抑制剂。合成的第一链cDNA能直接用于PCR或荧光定量PCR的模板，第二链cDNA的合成或线性RNA扩增，也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。

• 本制品采用耐高温逆转录酶，大幅提高热稳定性和cDNA合成效率；
  
• 本制品中添加的BalbScript II反转录酶无RNase H活性，可避免第一链cDNA合成过程中，RNA/DNA杂交模板链中RNA降解，保证cDNA合成的质量；
  
• 本制品中Random N6和Oligo(dT)18引物比例经过优化，可均匀合成样品中的cDNA；
  
• 本制品中含有去基因组成分，逆转录时可同步去除基因组DNA污染。
  
• 本制品提供了2×BalbScript Plus No RT Control，用于配制无逆转录酶对照反应，检验RNA模板中是否存在基因组DNA残留。

• 用DEPC处理实验用到的所有实验器材，或者购买已经证明无核酸酶的实验用具，实验过程戴手套并经常更换手套，避免RNA酶的污染。
  
• 确保所用试剂中无RNA酶污染。
  
• 试剂盒要严格密封保存。在逆转录过程中，所有管子要确保扣严。
  
• 纯化过的RNA必须保证不含有盐，金属离子，乙醇和苯酚，以上成分会干扰第一链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。
  
• 为保证逆转录反应的有效进行，需使用高质量的RNA模板。
  
• 当模板含量较低或后续PCR扩增片段过长时可以适当延长逆转录时间。
  
• 2×BalbScript Plus 1st cDNA Synthesis SuperMix、gDNA Purge及2×BalbScript Plus No RT Control含有甘油，使用前请充分混匀后并短暂离心收集至管底再进行使用。

• 按下表加入各成分配制反应体系，并移液器轻轻混匀后短暂离心至管底。
  

  成分	用量
  2×BalbScript Plus 1st cDNA Synthesis SuperMix	10μL
  模板RNA	总RNA(0.1ng～1μg) mRNA(≥10pg) 特异性RNA(≥0.01pg)
  gDNA Purge	1μL
  RNase-Free Water	至20μL

• No RT Control反应（可选）
  用于配制无逆转录酶对照反应，检验RNA模板中是否存在基因组DNA残留。
  

  成分	用量
  2×BalbScript Plus No RT Control	10μL
  模板RNA	总RNA(0.1ng～1μg) mRNA(≥10pg) 特异性RNA(≥0.01pg)
  gDNA Purge	1μL
  RNase-Free Water	至20μL

• 反应程序
  

  温度	时间
  50℃	15min
  85℃	5s