产品货号:
JN5042
中文名称:
一步法RNA qPCR MasterMix
英文名称:
2×RNA-direct qPCR MasterMix
产品规格:
100T|500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是采用探针法进行一步法qRT-PCR的定性、定量反应专用试剂。在同一体系中,完成从反转录到qPCR的全部反应。本制品采用抗体修饰的Tth酶,通过高温反转录过程,有效消除了RNA高级结构和低温条件下引物非特异性退火对cDNA合成的不利影响,从而增加了反转录的特异性,提高了扩增的效率和产量。并结合特别配方的反应缓冲液,可以在较宽的定量区域内得到良好的标准曲线,准确定量。
- 同时具有反转录酶活性与聚合酶活性,能够用于一步法检测。
- 具有更高的反转录温度60℃~70℃,反转录的特异性高。
- 对PCR抑制物具有更高的耐受性。
组分 | 100T | 500T |
2×RNA-direct qPCR MasterMix | 1mL | 5mL |
50mM Mn(OAc)2 | 100μL | 500μL |
保存:-20℃
- Tth的反转录温度在60℃~70℃,反转录时间可以为15~30min;
- 该体系更适合于特异性引物进行RT反应,并且引物Tm值应为60℃或更高温度;
- 反应体系中含有Mn2+,因此,本体系保真度有所降低,不适合于保真度要求较高的克隆、测序等实验;
- 使用时请上下颠倒轻轻混合,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,尽量避免污染。
- 常用反应体系
2.推荐反应程序成分 用量 2×RNA-direct qPCR Master Mix 10μL 50mM Mn(OAc)2 1μL 探针(10μM) 0.4μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 模板 0.01~500ng RNase-Free Water 至20μL 循环数 温度 时间 1 90℃ 30s 1 60℃ 25min 1 95℃ 3min 40~45 95℃ 10s 60℃ 30s
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