产品货号：
JN5026
中文名称：
甲基化分析试剂盒(荧光定量法)
英文名称：
BalbStart MethyLight qPCR Kit
产品规格：
400T|2000T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒适用于qPCR荧光定量法检测DNA的甲基化。本试剂盒包含经过特殊工艺处理的Enzyme Mix以及精心优化的5×Probe qPCR Buffer，Enzyme Mix是抗Taq单克隆抗体和Taq DNA Polymerase的混合制品，适用于HotStart PCR。高温加热前，抗Taq单克隆抗体与Taq DNA聚合酶结合，抑制聚合酶的活性，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。该产品适用于常规的qPCR/Multiplex qPCR，也能够用来检测DNA的甲基化，可以对其进行定量或半定量的甲基化分析。
亚硫酸氢盐处理DNA模板后，甲基化的CpG序列仍然保持CpG序列形式，未甲基化的CpG序列会转变为UpG序列。然后针对CpG和UpG所在的片段设计两对引物，进行qPCR，通过比对Ct值来确定甲基化水平。或者，只设计一对针对甲基化CpG片段的引物进行半定量分析。
该产品可应用于表观遗传学的研究，主要涉及肿瘤，干细胞和器官发育等。特别是在癌基因检测方面有着很好的应用。
| 组分 | 400T | 2000T |
| MethyLight Enzyme Mix | 200μL | 1mL |
| 5×Probe qPCR Buffer | 1mL×2 | 10mL |
保存：-20℃
请上下颠倒轻轻混合均匀避免起泡，经轻微离心后使用。
- 常用反应体系
成分 用量 5×Probe qPCR Buffer 5μL MethyLight Enzyme Mix 0.5μL 上游引物/下游引物 各0.2～1.0μM(终浓度) 探针(10μM) 0.5μL 模板 1～2μL(10ng～1μg) RNase-Free Water至 25μL - 常用反应程序
- 两步法：
反应阶段 温度 时间 循环数 预变性 95℃ 10min 1 变性 95℃ 20s 35～45 退火/延伸 60℃ 30～60s - 三步法：
反应阶段 温度 时间 循环数 预变性 95℃ 10min 1 变性 95℃ 20s 35～45 退火 50～60℃ 20s 延伸 72℃ 30s
- 两步法：
相关搜索：甲基化分析试剂盒(荧光定量法)，荧光定量，qPCR，MethyLight，甲基化分析，Taq抗体，Taq酶，热启动，DNA甲基化，定量分析，半定量分析，BalbStart MethyLight qPCR Kit