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本制品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。预混液中已经将DNA聚合酶、精心优化的反应Buffer、dNTPs、SYBR Green I等试剂预混在一起，是一种2×浓度的预混型试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分简单方便。

本制品使用新型抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶，并结合精心优化的反应Buffer，从而有效抑制低温下的非特异性扩增，提高反应特异性和扩增效率，能够在更宽广的范围内进行准确定量。

• 高特异性：采用新型工艺制备抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶，无需热启动即可进行PCR反应，大大提高PCR扩增的特异性。
  
• 高效：精心配制的RealTime PCR专用2×SuperMix，具有更高的扩增效率和扩增灵敏度。
  
• 快捷：PCR反应所必需试剂集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制。

• 使用：请上下颠倒轻轻混合均匀，避免起泡，并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的（无污染的）枪头、Microtube等，避免污染。建议反应体积为20～50μL。
  
• 引物设计：一般为了增加灵敏度及扩增效率且抑制非特异性反应，扩增目标序列越短越好。建议设计成200bp以下。

• 按下表加入各成分配制反应体系
  

  成分	用量
  2×SYBR qPCR SuperMix Plus	10μL
  上游引物	0.2～1.0μM（终浓度）
  下游引物	0.2～1.0μM（终浓度）
  模板	1～2μL
  ROX（需根据机器型号选择）	0.4μL
  RNase-Free Water	至20μL

• 常用PCR循环
  两步法可获得高特异性，三步法可获得高扩增率，用户根据需求选择扩增程序。
  
  • 两步法扩增程序：
    

    温度	时间	循环数
    95℃	1分钟	1
    95℃	20秒	35～45
    60℃	1分钟

  • 三步法PCR扩增程序：
    

    温度	时间	循环数
    95℃	1分钟	1
    95℃	20秒	35～45
    50～60℃	20秒
    72℃	30秒

• ROX I校准的Real Time PCR仪有：
  ABI 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast；
  ABI StepOne/StepOnePlus及其他仪器。
  
• 用ROX II校准的Real Time PCR仪有：
  ABI 7500/7500 Fast；
  ABI ViiA7;ABI Q5 Q6；
  ABI Quant Studio 6/7 Flex；
  Stratagene MX4000/MX3500P/MX3000P及其他仪器。
  
• 不需要用ROX校准的Real Time PCR仪有：
  Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/iQ/My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon/Chromo4；
  Eppendorf MasterCyclerrealplex/realplex 2s；
  Cepheid SmartCycler；
  Illumina Eco qPCR；
  Roche Applied Science LightCycler 480；
  Thermo Scientific PikoReal Cycler；
  Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/RotorGene 6000及其他仪器。