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本制品是抗Taq单克隆抗体和Taq DNA聚合酶的混合物，适用于Hot Start PCR。高温加热前，抗Taq单克隆抗体与Taq DNA聚合酶结合，抑制聚合酶的活性，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已变性，因此无需热启动步骤，在常规PCR反应条件下即可使用。本制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量（>60%），有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组扩增检测。

本制品不包含甘油等影响冻干工艺的成分，且添加了冻干保护剂及赋形剂，可直接用于冻干样品的制备，以提高样品的稳定性和易用性。

• 该产品可用于制作冻干粉或冻干小球；
  
• 高特异性PCR反应；
  
• 复杂模板扩增；
  
• Multiplex PCR；
  
• 基因组扩增检测；
  
• 荧光定量PCR。

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

组分	250U	2500U
热启动Taq DNA聚合酶(含Taq抗体，可冻干)	50μL	500μL
5×HS Taq Buffer(含Mg2+，可冻干)	1mL	10mL

保存：-20℃


经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。


使用本试剂扩增得到的PCR产物3'端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中。


本制品中Taq酶及5×HS Taq Buffer均已含有冻干辅料，若需增加其他冻干辅料，需根据实际检测数据评估后增加。

• 样品制备及使用
  
  • 将热启动Taq DNA聚合酶及5×HS Taq Buffer根据需求进行冻干样品制备；
    
  • 将制备后的样品加入RNase Free Water进行溶解即可使用。溶解后的剩余试剂可置于-20℃保存，下次实验融化后直接使用即可。
• 常用反应体系（50μL）：
  

  成分	用量
  5×HS Taq Buffer	10μL
  上/下游引物	0.2～1.0μM (终浓度)
  dNTPs (10mM each)	1.0μL
  模板	1～50ng (质粒) 10ng～1μg (基因组)
  热启动Taq DNA聚合酶	0.25μL (1.25U)
  ddH2O	至50μL

• 常用PCR扩增程序：
  
  • 两步法扩增程序：
    

    温度	时间	循环数
    94℃	1分钟	1
    95℃	20秒	35～40
    60℃	根据产物长度调整

  • 三步法扩增程序：
    

    温度	时间	循环数
    94℃	1分钟	1
    95℃	15秒	35～40
    50～60℃	20秒
    72℃	根据产物长度调整

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