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本制品是将PCR反应所需的Taq Plus DNA聚合酶、dNTPs、MgCl₂以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq Plus MasterMix专为DNA大片段PCR扩增反应优化，扩增长度增加，保真度好，扩增速度快，反应效率高，适合于扩增1～20kb长度的片段。使用时只需加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，大大地简化了操作过程，减少了PCR操作过程中的污染。使用本制品扩增得到的PCR产物具有3'端"A"突出，因此可直接克隆于T载体中。

• 可替代大部分2×Taq Master Mix的用途；
  
• 需高灵敏度的PCR扩增；
  
• 大片段PCR扩增反应(可达20kb)。

• 更高效：以λDNA为模板，扩增长度可达20kb。
  
• 更灵敏：比Taq酶扩增灵敏度更高。
  
• 稳定：反复冻融几十次，4℃放置30天，室温放置一周后，扩增性能不受影响。
  
• 快捷：PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制。

• 需溶解完全后使用，防止离子浓度不均匀。
  
• 应根据实验目的选择合适的循环数，循环数过少，会造成扩增量不足。循环数过多，扩增量增加，但突变率会增加，并造成非特异性扩增。
  
• 根据引物Tm值设置合适的退火温度，退火温度过低，会造成非特性扩增。退火温度过高，可能扩增不到目的条带。

• 常用反应体系（50μL）：
  

  成分	用量
  2×Taq Plus MasterMix	25μL
  上游引物	0.2～1.0μM（终浓度）
  下游引物	0.2～1.0μM（终浓度）
  模板	1～50ng（质粒） 10ng～1μg（基因组）
  ddH2O	至50μL

  注：Mg²⁺终浓度为2mM。
  
• 常用PCR反应程序：
  
  • 当扩增片段＜3K：
    

    反应阶段	温度	时间	循环数
    预变性	94℃	90s	1
    变性	94℃	20s	30
    退火	50～60℃	20s
    延伸	72℃	1kb/60s
    终延伸	72℃	5min	1
    保温	4℃	-	1

  • 当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）：
    

    反应阶段	温度	时间	循环数
    预变性	94℃	5min	1
    变性	94℃	5s	30
    退火/延伸	68℃	1kb/60s
    终延伸	72℃	5min	1
    保温	4℃	-	1