产品货号:
JN0006
中文名称:
一步法RT-PCR试剂盒
英文名称:
BalbScript One-Step RT-PCR Kit
产品规格:
200T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒是基于BalbScript M-MuLV反转录酶和热启动Taq DNA聚合酶,对缓冲液体系进行优化使反转录酶和聚合酶同时发挥最大功效,具有方便、快速、灵敏度高、重复性好等特点。该试剂盒能以动物、植物和微生物的总RNA或mRNA为模板,cDNA合成和PCR反应在一个管中进行,反转录结束后可直接进行PCR循环而不用增加额外的步骤;同时可对低至0.1ng的总RNA进行扩增,有助于大量样品的处理并减少污染机会。
- 效率高,可反转录GC含量高,二级结构复杂的RNA模板。
- 独特的缓冲体系使反转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。
- 操作简单,可最大限度的避免污染。
组分 | 规格 |
BalbScript RT Enzyme Mix | 200μL |
2×BalbScript One-Step SuperMix | 1mL×2 |
RNase Free Water | 1mL×2 |
保存:-20℃
所有组分经检测均无核酸内切酶残留、核酸外切酶残留、核酸残留。
- 本试剂盒PCR扩增延伸时间为1kb/min,客户可根据具体片段长度进行延伸时间的调整。
- 通常情况,28~30个循环可达到最佳扩增,对于低拷贝目的基因的检测,可将循环数增加到40个。
- 如果同时操作多个样品,建议先在冰上先配制预混液,然后再分装到各个反应管中,加入模板启动反应。
- 反应出现目标条带拖带,系模板浓度过高或特异引物浓度不适等原因所致,可对模板及引物浓度等进行调整;反应出现杂带,可对退火温度进行调整,或重新设计特异性高的引物。
- 本试剂盒只需使用特异性反转录引物,无需使用Random Primer和OligodT Primer等进行反转录反应。
- 为了保证反应的正常进行,需使用高质量的RNA模板。
- 将RNA模板、引物、2×BalbScript One-Step SuperMix,BalbScript RT Enzyme Mix和RNase Free Water溶解并置于冰上备用。
- 配制以下反应体系:
成分 用量 模板RNA 0.1ng~5μg BalbScript RT Enzyme Mix 1μL 2×BalbScript One-Step SuperMix 10μL 上游引物(10μM) 0.5~1μL 下游引物(10μM) 0.5~1μL RNase Free Water 至20μL - 轻轻混匀后短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
- 设置反应程序:
温度 时间 循环数 42℃ 30min 1 95℃ 2min 1 95℃ 20s 30~35 55~60℃ 20s 72℃ 1kb/60s 72℃ 5min 1 4℃ 保温 1
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