产品货号:
GS5313
中文名称:
抗体修饰热启动酶防污染PCR预混液
英文名称:
25×AnboStart PCR MasterMix
产品规格:
100T|500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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简要说明:
产品组成:
保存:-20℃,有效期1年。
使用方法:
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本试剂提供了进行简便、灵敏和防污染的PCR检测系统。核心试剂包含了经过优化的缓冲液、dNTPs Mix(以dUTP替代dTTP)、抗体修饰热启动酶(AnboStart Taq DNA polymerase)、UDG酶(Uracil-DNA Glycosylase)和MgCl2溶液,使用者只需加入适量的引物和探针或荧光染料,即可进行荧光PCR检测。在PCR反应前加入UDG可降解含有尿嘧啶的PCR产物,而对不含尿嘧啶的模板无任何影响。在反应中AnboStart Taq DNA polymerase的加入使得反应具有极强的特异性和高度灵敏度。
产品组成:
| 组分 | 100T | 500T |
| 25×AnboStart PCR MasterMix | 200μL | 1mL |
| 5×Reaction Buffer(含Mg2+) | 1mL | 5mL |
保存:-20℃,有效期1年。
使用方法:
- PCR反应体系的设置:
- 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液。并放置于冰浴上或冰盒内。建议反应PCR液体分装使用,避免反复冻融。
- 参考下表设置的反应,建议PCR反应体系的配制在冰浴或在冰盒上进行:
成分 用量 25×AnboStart PCR MasterMix 2μL 5×Reaction Buffer(含Mg2+) 10μL 引物-探针混合物 4μL 模板DNA x μL ddH2O 至50μL 引物、探针以及模板的用量根据实验用量加入,体系不够请用双蒸水补齐。 - 用移液器轻轻吹打混匀或轻微Vortex混匀,室温离心数秒,使液体积聚于管底。
- 各设置好的PCR反应管置于PCR仪上,开始PCR反应。
- 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液。并放置于冰浴上或冰盒内。建议反应PCR液体分装使用,避免反复冻融。
- PCR反应参数的设置:
步骤 温度 时间 循环数 UDG处理 50℃ 2min 1 UDG失活 95℃ 2.5min 1 变性 94℃ 15s 40 退火 55℃ 30s 熔解曲线分析 按照仪器要求进行设置 - AnboStart Taq DNA Polymerase的热激时间2min 30sec到15min都可以,所以95℃、2min 30sec(UDG失活,热启动酶热激)的时间可以根据实验要求进行设置,使用时时间从2min 30sec到15min设置都可以,比较灵活。另收集荧光设置为两步或者三步可以根据您的实验设置自行设定。
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