产品货号:
BY0006
中文名称:
PCR反应预混液
英文名称:
2×PCR Mix(Red)
产品规格:
1mL|2mL|5mL|10mL|25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品为含有高纯度Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分的2×的即用型PCR预混液,适合大规模基因检测、快速克隆筛选、半定量PCR实验和微量DNA模板的检测等。PCR产物的3’端附有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于T载体克隆。本产品有含染料,在PCR反应完成后,PCR产物不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。PCR扩增产物不推荐用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
保存:-20℃避光,避免反复冻融,有效期1年。
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- 灵敏度高,扩增性能强,稳定性好。
- 操作简单:使用时只需加入DNA模板和引物,用水补足体系,可减少人工误差,缩短操作时间。本产品含有红色染料,PCR结束后不需添加上样缓冲液可直接上样电泳。
- PCR产物的3’端含有一个突出的碱基A,纯化后可直接用于T载体克隆。
- PCR产物经过纯化处理,可用于酶切、连接、荧光测序等实验。
组分 | 1mL | 2mL | 5mL | 10mL | 25mL |
2×PCR Mix(Red) | 1mL | 2×1mL | 5×1mL | 10×1mL | 5×5mL |
DEPC水 | 1mL | 2×1mL | 5×1mL | 10×1mL | 5×5mL |
保存:-20℃避光,避免反复冻融,有效期1年。
- 建立反应体系
融解PCR反应所需的各种溶液,上下颠倒轻轻混匀后离心数秒。 按下表加入各成分配制20μL反应体系。成分 用量 DNA模板 1μL 正向引物(10μM) 0.4μL 反向引物(10μM) 0.4μL 2×PCR Mix(Red) 10μL DEPC水 至20μL
注:模板用量建议10~1000ng基因组DNA,1~30ng质粒,或1~2μL RT-PCR反应后的cDNA。 - 设置反应程序
过程 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 2min 1 变性 94℃ 30s 25~32 退火 55~65℃ 10s 延伸 72℃ 10s/kb 终延伸 72℃ 5~10min 1
注:以上举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系。 - 结果检测
取2μL反应液,琼脂糖凝胶电泳观察结果。
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