产品货号：
BM0373
中文名称：
RNA扩增试剂盒(冻干制剂，荧光探针法)
英文名称：
Fluorescent RT Isothermal Amplification Kit(Lyophilized)
产品规格：
48T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是通过液氮点液冻干技术制备的即用型逆转录-荧光法恒温扩增试剂盒，含有除引物、模板和探针外的所有组分。用户仅需加入RNA模板、引物、EXO荧光探针、Mg2+和水，即可在37～42℃恒温下快速完成RNA逆转录与cDNA扩增，并可实时检测荧光信号。
| 组分 | 规格 |
| Lyophilized Fluorescent RT Iso-Amp Mix | 48粒 |
| Mg(OAc)2 (280mM) | 200μL |
保存：＜28℃，严格防潮，不可剧烈振荡。
- 核酸内切酶活性：将1粒Lyophilized Fluorescent RT Iso-Amp Mix溶于25μL ddH2O，再与200ng超螺旋质粒DNA在37℃下共同温育4h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于10%的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。
- RNase活性：将1粒Lyophilized Fluorescent RT Iso-Amp Mix溶于25μL ddH2O，再与500ng总RNA在37℃下温育1h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，超过90%的RNA仍保持完整。
- 扩增产物的气溶胶易造成假阳性，为避免交叉污染，建议有条件的用户在基因扩增实验室内操作，加样与扩增在不同区域进行。
- 实验时应设置不加模板的空白对照（建议使用开盖无菌水），以确认是否有待扩增核酸的污染。
- 按下表配制反应体系：
试剂 使用量 终浓度 Lyophilized Fluorescent RT Iso-Amp Mix 1粒 RNA模板 5μL 正向引物(10μM) 1μL 0.4μM 反向引物(10μM) 1μL 0.4μM ddH2O 至23.7μL - 引物长度建议为30～35nt，内部无二级结构和连续单碱基重复序列，引物Tm不作考虑。扩增目标片段长度建议为200～500bp。
- 待微球完全溶解后，在反应管盖上加上1.3μL Mg(OAc)2 (280mM)。小心盖紧管盖，上下颠倒5次，瞬时离心收集至管底。
- 迅速将反应管放入预热好的荧光扩增设备中，在37～42℃（建议40℃）下恒温反应20～30min，每隔30 s采集一次荧光信号。
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