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本制品为来源于嗜热菌Thermus aquaticus，经大肠杆菌重组表达纯化获得的耐热性DNA聚合酶，分子量为94kDa，与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。该酶具有5'→ 3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性，但无3'→ 5'外切酶活性。PCR产物的3'端带有突出的A碱基，可克隆至T载体。

• 蛋白纯度检测：使用SDS-PAGE凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于95%。
  
• 核酸内切酶活性检测：将5U Taq DNA Polymerase与200ng超螺旋质粒DNA在37℃下，共同温育4h后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，少于10%的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。
  
• 非特异性核酸酶活性检测：将5U Taq DNA Polymerase与15ng双链DNA片段在37℃温育16h，使用琼脂糖凝胶电泳检测双链DNA底物无变化。
  
• 宿主DNA残留检测：使用大肠杆菌16S rDNA特异性引物探针组，采用荧光定量PCR法检测5U Taq DNA Polymerase，大肠杆菌宿主基因组DNA残留低于1 copy。

• 建议的PCR反应体系
  

  成分	用量	终浓度
  Taq DNA Polymerase(5U/μL)	0.25μL	1.25U/50μL
  10×Taq Reaction Buffer	5μL	1×
  dNTP(10mM)	1μL	0.2mM
  正向引物(10μM)	1μL	0.2μM
  反向引物(10μM)	1μL	0.2μM
  模板DNA	x μL	-
  ddH2O	至50μL	-

  • 引物推荐终浓度为0.2μM，效果不佳时可以在0.1～1μM进行调整；引物长度请设定18～25bp，GC含量为40%～60%。
    
  • 不同模板最佳反应浓度有所不同，以50μL体系为例：模板为基因组DNA时，一般使用量应在10～400ng；当模板为质粒或病毒DNA时，一般使用量应在10pg～20ng。
• 常规PCR反应程序
  

  步骤	温度	时间	循环数
  预变性a	94℃	3～5min	1
  变性	94℃	30 s	30～35
  退火	55～65℃	30 s
  延伸	72℃	30~60 s/kb
  终延伸	72℃	5min	1

  • 该预变性条件适合绝大多数扩增反应，对于一些复杂模板，例如：菌液、菌落（尤其是酵母）的PCR扩增，预变性时间可适当延长至10min，以提高预变性效果。
    如果使用酵母菌液作为PCR扩增模板，建议目的片段长度不超过2.5kb；若超出2.5kb，建议将酵母菌液预先进行破壁处理。