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本制品包含Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl₂、反应缓冲液等成分。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。可用于长片段DNA扩增和GC含量高，二级结构丰富的片段扩增。

本制品使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量2×Long-Taq PCR MasterMix，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积即可，使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。

• 经检测无外源核酸酶活性。
  
• PCR方法检测无宿主残余DNA。
  
• 能有效地扩增人基因中的单拷贝基因。
  
• 室温存放一周，无明显活性改变。

• 扩增长片段强烈推荐使用0.2μL薄壁管。其他试管未经测试。较厚的试管在92℃时不能有效地使模板变性。变性时，尽可能缩短变性时间，降低变性温度。第一步变性在92～94℃下进行2分钟（GC含量高可延长时间达5分钟）。长片段在循环过程中尽可能缩短变性时间（92～94℃下进行10～15秒），除非模板中富含GC，则95℃下变性30秒。这可以防止DNA脱嘌呤和链断裂，对于所需扩增的基因组DNA片段终长度超过12kb时，应该尽可能的降低变性温度和时间。变性需要的时间在不同的PCR仪器上稍有不同。
  
• 如果扩增模板GC含量高或者扩增片段比较长，可在反应混合物中加入甜菜碱或者DMSO，甜菜碱终浓度1-2.5M；DMSO到终浓度1%～8%，最常用2％（<30kb）或者4％（>30kb）往往会改善扩增效果。
  
• 扩增长片段，引物一般终浓度为0.3～1μM，长度最好为27～36bp；退火温度一般在65～70℃，此时退火温度和延伸温度基本一致，可将退火延伸在同一个温度进行，使用2阶段扩增法。当然如果设计的引物在20bp左右，则还是使用传统3阶段扩增法为好。

• 用2×Long-Taq PCR MasterMix，以人基因组DNA为模板，扩增1kb的片段，反应体系为50μL（如反应体系不同，可按此比例增加或减少用量）。
  

  成分		用量
  模板	λ噬菌体DNA 人基因组DNA	0.1～5ng 1～1μg
  引物1(20μM)		0.5～1μL
  引物2(20μM)		0.5～1μL
  2×long-Taq MasterMix		25μL
  ddH2O		至50μL

• PCR反应循环的设置：
  

  温度	时间	循环数
  94℃	3min	1
  94℃	30sec	30
  55℃	30sec
  72℃	1min
  72℃	5min	1

• 结果检测：反应结束后取5μL反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。