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组织细胞直接扩增试剂盒图片
产品货号:
ALH203
中文名称:
组织细胞直接扩增试剂盒
英文名称:
DirectFree Animal Tissue PCR Kit
产品规格:
100T|500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本试剂盒采用独特的裂解缓冲液快速裂解动物组织,释放的DNA无需纯化便可以作为模板,用高度耐抑制物的2×DirectFree PCR Mix扩增,一般扩增模板长度不超过2.5kb,扩增产物可直接上样电泳。




动物组织(哺乳动物,海洋动物,昆虫等)、细胞、唾液、毛发等。


组分100T500T
Buffer AD10.75mL3.75mL
Buffer AD27.5mL37.5mL
2×DirectFree PCR Mix1mL5mL
ddH2O10mL50mL

保存:按标签指示条件保存,有效期1年。


2×DirectFree PCR Mix需-20℃保存,避免反复冻融次数过多,3周内短时间使用可放4℃保存。其余常温或者4℃保存,有效期12个月。


  • 如果扩增条带较弱,可以适当增加或者减少模板加入量,裂解混合物模板一般可以在1μL~4μL内调节。
  • 如果非特异扩增较多,可调整退火温度,或者适当增减模板用量。
  • 各溶液使用完毕后,应该立刻盖紧盖子,以免PH改变影响质量。



  • 配制即用裂解液:按照10μL Buffer AD1 + 90μL ddH2O = 100μL比例混合配制成即用裂解液。每个样品需要75μL即用裂解液,具体量可以根据样品数量按照比例放大配制即可。即用裂解液可常温存放1个月。
  • 取75μL裂解液于0.2mL PCR薄壁管中(没有PCR仪器者也可以用0.5mL离心管)。然后加入2mm见方的组织(切记不可多加,多加反而抑制下游PCR),组织块浸没在裂解液内。
  • 98℃裂解30min(建议PCR仪上操作),根据情况裂解时间可以在10分钟~1小时内调整。
  • 取出离心管迅速放冰上,加入75μL Buffer AD2,混匀,即可直接用做PCR模板或置于4℃或-20℃保存。
  • PCR扩增:
    • 配制反应体系:
      成分用量终浓度
      裂解混合物模板1~2μL根据需要加入
      2×DirectFree PCR Mix10μL
      Forward Primer (10μM)0.4μL0.2μM each
      Reverse Primer (10μM)0.4μL0.2μM each
      ddH2O至20μL-
    • PCR扩增反应程序:
      温度时间循环数
      95℃5min1
      94℃30sec 35~40
      54~60℃30sec
      72℃1kb/min
      72℃5~10min1

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