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鼠尾胶原蛋白I型是通过Birkedal-Hansen1的方法，通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。

我司鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿，培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶，模拟真实的生长环境，使细胞在三维环境中生长。

• 无尘车间内生产，保证洁净度。
  
• 可用于包被细胞培养器皿(单分子层包被)。
  
• 也可形成具有一定强度的三维胶用于细胞的三维空间培养。
  
• 通过细胞培养测试(包括三维胶内的细胞培养)。
  
• 电泳结果和进口S品牌的同类产品无显著区别。
  
• 产品为无菌的溶液，省去从干粉配制的麻烦。

我司鼠尾胶原蛋白包被的培养皿中生长的PC-12细胞	我司鼠尾胶原蛋白三维胶中生长的NIH-3T3细胞(接种后5天)
和进口S品牌鼠尾胶原蛋白SDS-PAGE电泳对比。A:进口S品牌B：我司

• 细胞培养器皿的表面包被
  推荐浓度：1～5μg/cm2
  以包被浓度为2μg/cm2为例：
  用无菌0.006mol/L(0.36g/L)乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/ml。按表(一)体积加到相应的培养器皿中：
  

  	表面积(cm2，每孔或每皿)	加入0.012mg/ml胶原的体积(ul)
  96孔细胞培养板	0.3	50
  24孔细胞培养板	1.9	300
  12孔细胞培养板	3.8	600
  6孔细胞培养板	9.5	1580
  35mm细胞培养皿	8	1330
  60mm细胞培养皿	21	3500
  100mm细胞培养皿	55	9170

  
  确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面，开盖在超净台上过夜晾干。也可以在室温放置1小时后，用PBS洗3～4次后直接使用。
  包被好的器皿在4～25℃至少可保存3个月以上的时间。
  
• 三维胶原的制备
  我司鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH7左右时可形成具有一定强度三维胶，建议成胶浓度1～2mg/ml。我司胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X体积的0.1mol/L NaOH来中和。
  需要的溶液(均需要无菌、预冷):10xPBS(可含10mg/L的酚红用于pH指示)或10×培养液，0.1mol/L NaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用)，双蒸水。
  
  • 不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例)：将200μL我司鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690μL H2O。然后加到12μL 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12μL 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结)，立即混匀。再加入100μL 10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10xPBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。
    
  • 含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例)：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200μL我司鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到12μL 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12μL 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结)，立即混匀。再加入23μL 10×PBS或10×培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760μL的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。
    注：鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。