产品目录

无酶细胞消化液不含胰蛋白酶等蛋白消化酶类，但能有效地使贴壁细胞与培养瓶皿表面脱离而达到分离细胞目的。消化后的细胞可进行传代培养，亦可用于提取核蛋白和胞浆蛋白、Western Blot、免疫共沉淀等实验，通常室温下10min左右就可以消化下大多数贴壁细胞，该消化液适用于消化肿瘤、脑、肝、肾、肺组织等，尤其适用于上皮组织。

• 作用温和；
  
• 对细胞的损伤和破坏极小，不影响细胞生物学特性，是肿瘤细胞的极好细胞脱壁方法；
  
• 可以在血清存在的情况下进行消化。

• PBS、培养液
  
• 显微镜
  
• 离心机

• 尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
  
• 在使用细胞消化液的过程中，要特别注意避免消化液被细菌污染。
  
• 细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 贴壁细胞的消化
  
  • 吸除培养液，用无菌PBS、培养液洗涤细胞1次。
    
  • 加入少量无酶细胞消化液，略盖过细胞即可(一般按细胞的有效体积的10倍添加)。
    
  • 室温放置10min，如置于37℃脱壁反应会加速，直到细胞完全脱壁，不同的细胞消化时间有所不同。亦可显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除消化液。
    
  • 加入细胞培养液或5倍体积PBS缓冲液终止反应。如果发现消化不足，则加入无酶细胞消化液重新消化。
    
  • 1000～2000g离心3～5min，沉淀细胞，弃上清，尽量去除无酶细胞消化液，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
• 组织的消化
  
  • PBS、培养液清洗组织1次，用无菌的刮勺或茶匙将剪碎的组织碎片转移至合适容器。
    
  • 按组织有效体积的5～10倍，加入无酶细胞消化液。
    
  • 置于37℃作用4～48h，无需振荡，不同的细胞消化时间有所不同。对于较难分解的肿瘤细胞，可作用5天或更长时间，但应重新用消化液悬浮。
    
  • 吹打组织碎片数次，释放松散的细胞，轻轻晃动培养瓶或皿，倒置显微镜下检查分离情况，当细胞量少和/或在组织碎片中仍可见细胞时，需要继续消化。
    
  • 1000～2000g离心3～5min，沉淀细胞，弃上清，尽量去除无酶细胞消化液，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。