产品货号:
KD1290
中文名称:
蛋白酶抑制剂混合物(细菌, 100×)
英文名称:
Protease Inhibitor Cocktail(bacteria, 100×)
产品规格:
1ml
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1~3天
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产品组成:
产品简介:
细菌提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用,100X)是一种用于细菌蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物,包含以下有效成分:23mM AEBSF,2mM Bestatin,0.3mM E64 and 2mM Pepstatin A in DMSO。并提供独立包装的0.1M EDTA(100×)。
使用方法:
1.常温溶解抑制剂混合物,摇匀。
2.根据需要选择加入抑制剂混合物,按照1:100的比例加入到裂解液中(1mL裂解液中加入10μL蛋白酶抑制剂混合物)。(根据需要,100×EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中)
3.加入抑制剂混匀后,立即开始蛋白提取。
注意事项:
1.加入抑制剂混合物的裂解液宜现用现配。
2.抑制剂混合物尽量避免反复冻融,如需多次使用,可根据需要分装冻存。
3.用于检测金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA。
4.产品组成及作用:本产品可以有效抑制细菌提取物中的各种蛋白酶活性,如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝氨酸蛋白酶不可逆抑制剂,其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作为PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Bestatin是氨基肽酶可逆抑制剂;E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂;Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制剂;EDTA作为螯合剂是金属蛋白酶的可逆抑制剂。
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